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【知识梳理】
基因工程
概念 2.诞生历程 3.基本工具 4.操作程序应用
【重点解析】
考点一 基因工程的工具及其操作程序
1.基因工程的基本工具
2.基因工程的基本操作程序
(1)目的基因的获取
①从基因文库中获取目的基因
优点:有了基因文库,就可以随时从中提取所需要的目的基因,引入受体细胞使之表达。
②人工合成目的基因
③利用PCR技术扩增目的基因
a.PCR:是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合PCR扩增是获取目的基因的一种非常有用的方法,也
b.目的:通过指数式扩增获取大量的目的基因。
(2)基因表达载体的构建
①目的’:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并可以遗传
②基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标
a.启动子:一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首RNA聚合酶识别、结合的部位。
b.终止子:一段有特殊结构的DNA短片段,位于基因的尾
C.标记基因:一般为抗生素抗性基因或荧光基因等,其作用是(目的基因是否导人成功)。
③基因表达载体的构建方法
(3)将目的基因导入受体细胞
①目的:目的基因进入受体细胞内并在受体细胞内维持稳
②受体细胞种类不同,导入方法不同③受体生物不同,所用的受体细胞种类也不相同
a.植物:可以是卵细胞(受精卵)、体细胞(可经组织培养成)。
b.动物:受精卵(因为体细胞的全能性受到严格限制)。
④转化实质:目的基因整合到受体细胞染色体基因组中。
(4)目的基因的检测与鉴定
1.基因工程的应用
(1)植物基因工程成果
①抗虫转基因植物(抗虫棉是转入Bt毒蛋白基因培育的)。
②抗病转基因植物(病毒外壳蛋白基因、病毒复制酶)。
③抗逆转基因植物(生物的抗性基因)。
④转基因改良植物(营养价值、实用价值、观赏价值)。
(2)动物基因工程成果
①提高动物生长速度(外源生长激素基因)。
②改善畜产品的品质。
③转基因动物生产药物(牛、山羊等动物乳腺生物反应a一抗胰蛋白酶)。
④转基因动物作器官移植的供体(导入调节因子抑制抗原)。
(3)基因工程药物
①来源:主要来自转基因工程菌。
②成果:细胞因子、抗体、疫苗、激素等。
③作用:预防和治疗人类肿瘤、心血管疾病、遗传病、各种
(4)基因治疗
①概念:是把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产
②成果:将腺苷酸脱氨酶基因转入患者淋巴细胞中,治疗
③方法
a.体外基因治疗:先从病人体内获得某种细胞,如T淋巴
b.体内基因治疗:直接向人体组织细胞中转移基因的治病方1994年美国科学家利用经过修饰的腺病毒作载体,成功地 比较项目 DNA聚合酶 DNA连接酶 形成磷酸二酯键的方式
只能将单个脱氧核苷酸连接起来,形成磷酸二酯键
是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键 不
同
点
是否需要模板
以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链 是将DNA双链上的两个缺VI同时连接起来,因此DNA连接酶不需要模板
是否参与基因工程 没有参与 在基因工程中,DNA连接酶可以作为连接运载体和目的基因的“针线” ①两者化学本质都是蛋白质。 ②两者均属于酶,具有酶的基本属性和特点。 相
同
点 ③两者都能形成磷酸二酯键,即在相邻核苷酸的3位碳原子的羟基与5位碳原子上所连接的磷酸基团的羟基之间形成。
④两者均参与DNA的复制、逆转录等过程。 一、导入新课
??? 众所周知,对于大多数生物而言, DNA是主要的遗传物质,有遗传效应的DNA片段叫基因,生物之所以体现出各种形态是基因表达的结果。但是各种生物间的性状千差万别这是为什么呢?
??? 提出问题,引导学生回答:生物体的不同性状是基因特异性表达的结果。
???列举几种生物的不同性状,如下:1.青霉菌能产生对人类有用的抗生素——青霉素。2.豆科植物的根瘤菌能够固定空气中的氮气。3.人的胰岛日细胞能分泌胰岛素调节血糖的浓度。
??? 以上几种生物各自有其特定的性状,这些性状都是基因特异性表达的结果,但是人类能不能改造基因呢?能不能使本身没有某个性状的生物具有某个特定性状呢?例如,让禾本科植物能够固定空气中的氮气;让微生物生产出人的胰岛素、干扰素等药物。这样既节省了人力,又简化了生产,同时还不会对环境造成污染。这种设想能实现吗?回答是可以的。通过科学家们的不断努力,在20世纪
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