大豆逆境诱导基因GmPRP克隆与表达.pdfVIP

作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2011, 37(12): 2152−2157 /zwxb/ ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9 E-mail: xbzw@ DOI: 10.3724/SP.J.1006.2011.02152 大豆逆境诱导基因GmPRP 的克隆与表达 翟 莹 雷婷婷 闫 帆 黄开猛 李晓薇 张庆林 张海军 苏连泰 孙 昕 王 英 李景文* 王庆钰* 吉林大学植物科学学院, 吉林长春 130062 摘 要: 通过对大豆吉林 32 未成熟胚表达谱的分析, 利用 RT-PCR 技术从大豆中克隆了一个新的脯氨酸富集蛋白基 因, 命名为 GmPRP。GmPRP 的开放阅读框长 396 bp, 其分子量 13.79 kD, 具有 131 个氨基酸残基, 等电点 8.96, 其 DNA 序列无内含子。GmPRP 蛋白序列 N 端含有一段信号肽, 中间为脯氨酸富集区, C 端为半胱氨酸富集区。该蛋白 与四季豆和木豆的 PRP 同源性最高, 具有较近的亲缘关系。GmPRP 的 683 bp 启动子序列含有 10 种与逆境相关的顺 式作用元件, 分别为 ABRE-like 、G-box 、W-box 、GT-1 、MYB 、MYC 、BIHD10s 、DPBF 、SEBF 和 WRKY 。实时荧 光定量 PCR 分析表明, 该基因表达量在大豆的根和叶中最高, 在茎和胚中其次, 在花中最低, 且受干旱、高盐、低温、 机械伤害及 SA (水杨酸) 、ETH (乙烯) 、ABA (脱落酸) 、MeJA (茉莉酸甲酯) 的诱导上调表达。 关键词: GmPRP; 大豆; 逆境胁迫 ; 启动子 ; 表达分析 Cloning and Expression of a Stress-induced GmPRP Gene in Soybean (Glycine max) ZHAI Ying, LEI Ting-Ting, YAN Fan, HUANG Kai-Meng, LI Xiao-Wei, ZHANG Qing-Lin, ZHANG * * Hai-Jun, SU Lian-Tai, SUN Xin, WANG Ying, LI Jing-Wen , and WANG Qing-Yu College of Plant Sciences, Jilin University, Changchun 130062, China Abstract: Plant proline-rich proteins (PRPs) are putative cell wall proteins, which are usually associated with different abiotic and biotic stress conditions. A soybean mRNA sequence encoding a proline-rich protein (PRP) was cloned and designated as GmPRP from Jilin 32 immature embryo gene expression profiles using RT-PCR. The GmPRP consisted of an ORF with a length of 396 bp, and encoded 131 amino acids (13.79 kD) with an isoelectric point of 8.96. There was no intron in the DNA sequence of GmPRP. Exce