毒死蜱与研究微生物降解与研究进展.docVIP

毒死蜱当前仍是全球应用最广泛的五种杀虫剂之一，也是我国用量最大的农药品种，是对硫磷、甲胺磷等高毒有机磷农药的替代品种，主要作为农用杀虫剂防治水稻、蔬菜等作物的螟虫、韭蛆等近百种害虫，也作为卫生杀虫剂用于防治白蚁和蟑螂等[5]。美国在20世纪末期毒死蜱年用量就已达到约7000吨，其中3/4以上被应用于植物保护，其余则用于家庭卫生。毒死蜱系列产品（乐斯本乳油）于1984年在我国农业部农药检定所取得登记，获准在水稻、棉花、蔬菜等作物上使用；同年，上海市政府在菜篮子工程建设中，推荐了乐斯本等几种农药用于防治蔬菜害虫，以彻底取代甲胺磷等高毒农药。 虽然毒死蜱属于中等毒性杀虫剂，但危险性仍然很大，它能够通过皮肤进入人体，并且在人体内有累积现象，长期或重复给予亚毒性剂量即可对细胞、神经轴突等产生影响，甚至可引起行为改变,WHO规定的毒死蜱可接受摄取量为10μg/kg/d[6,7]。例如，黄杆菌属Flavobacterium sp. ATCC 27551的水解酶能有效的水解几乎所有已知的O-P键缺陷单胞菌Pseudomonas diminuta。Mallick等报道一株从土壤中筛选出的节杆菌（Arthrobacter sp.）能在无机盐培养基中降解毒死蜱，能在48 h内将10mg/L毒死蜱完全降解Ghanem等[]和Li等[]分别分离到了Klebsiella sp.和Sphingomonas sp.，这两个菌株能以毒死蜱作为唯一碳源和磷源。Bending G.D.等[20]（2002年）筛选出2株能降解毒死蜱的真菌Hypholoma fascicularae和Coriolus versicolor。方华2007年从土壤中筛选到一株毒死蜱降解菌，经鉴定为轮枝孢属（Verticillium sp.）真菌。 大量的研究表明，在土壤或水体中微生物降解毒死蜱的主要中间产物是3,5,6-三氯-2-吡啶酚(3,5,6-trichloro-2-pyridinol,TCP)，如图1-3 [21,22]。Racke等人将毒死蜱用14C标记后进行微生物降解实验，其结果表明毒死蜱经土壤微生物作用后的初步降解产物为3,5,6-三氯-2-吡啶酚(TCP)，TCP能被进一步降解，终产物为CO2[23,24]。但TCP的进一步降解要缓慢得多，高浓度TCP对毒死的降解有抑制作用O,O-二乙基硫代磷酸()（diethylthiophosphate, DETP），它们均能被微生物完全代谢为无机物，Singh等人推测毒死蜱的微生物降解途径如图1-4，可能会产生约15种中间代谢物[2]。 毒死蜱的微生物降解也与环境因素密切相关，pH以及土著微生物等生物因子。在最近报道的一些研究中都显示毒死蜱的最大降解率一般都发生在中性或者碱性条件下，这可能是由于降解毒死蜱的关键酶在中性或碱性条件下有更大的酶活性，另外，在碱性条件下毒死蜱的稳定性会受到影响，其水解率变得更高[]。Singh等也报道了应用Enterobactor sp.降解毒死蜱，在碱性pH时实现了毒死蜱的快速降解，但在酸性pH时其速度则很慢[]。）2003）证实致黄假单胞菌Pseudomonas aureofaciens）对水稻纹枯病菌菌丝有强烈的致畸作用，并抑制菌核萌发，田间防效高于井冈霉素Pseudomonas chlororaphis防治芸薹菌核病，其防效与杀菌剂异菌脲相当[34]。另外，大量的链霉菌也被作为生防菌使用，例如，灰绿链霉菌K61菌株对康乃馨枯萎病有很好的防治效果，在欧美国家己经商品化生产。 迄今为止，也已有大量的生防真菌被用于作物病害防治，由生防真菌开发的生防制剂甚至多于生防细菌制剂，并已在农业生产中发挥了巨大的作用。主要的生防真菌品种有木霉、盾壳霉、无致病力的尖孢镰刀菌等。木霉属真菌由于具有生境广泛、对养分的要求低，易于分离和培养、生防疗效好等特点，已经成为目前研究最为广泛的一类生防真菌。Weindling等人早在20世纪30年代就发现木霉可以寄生许多土传真菌病害，如丝核菌属、镰刀菌属、小核菌属等，在土壤中适当添加木霉菌就能够防治一些真菌病害。重寄生作用被认为是木霉对作物病害生物防治的一个重要机制，该类木霉首先对真菌寄主进行识别，之后缠绕于病原菌的菌丝上，并侵入菌丝内而使其死亡。现己发现的具有生防作用的木霉有哈茨木霉、绿色木霉、长枝木霉、黄绿木霉等。例如，从土壤中获得的哈茨木霉（Trichoderma harzianum）T-22菌株，能有效防治番茄枯萎病、天竺葵立枯病以及由腐霉病菌（Pythium spp.）引起的碎倒病[35, 36]；绿色木霉T23菌株和TH-31菌株则分别对甜瓜枯萎病和豇豆褐斑病有很好的防治效果。 盾壳霉是核盘菌的重要寄生菌，对控制核盘菌菌核存活和子囊盘萌发十分有效，可用于防控由核