激活标签法构建拟南芥突变体库及其表型分析.pdfVIP

激活标签法构建拟南芥突变体库及其表型分析.pdf

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云 南 植 物 研 究 20 10 , 32 ( 1) : 53~59 DO I : 103724/ SPJ 114320 1009 167 Acta Botanica Yunnanica                    激活标签法构建拟南芥突变体库及其表型分析 1 2 1 2 2 关艳龙 , 李婉莎 , 殷奎德 , 杨永平 , 胡向阳 ( 1 黑龙江八一农垦大学 生命科学技术学院 , 黑龙江 大庆  1633 19 ; 2 中国科学院昆明植物研究所 中国科学院青藏高原研究所昆明部 , 云南 昆明 650204) 摘要 : 以拟南芥 (A rabi dop s is t hal i ana) 野生生态型 (Columbia) 植株为实验材料 , 以含有激活标记双元 质粒 p CB260 的农杆菌进行转化 , 并以抗除草剂 Ba st a 为筛选标记 , 构建了拟南芥激活标签突变体库 , 所 用 p CB260 双元质粒含有两个 D s 位点、一个 GFP 标记基因与一个抗 ba st a 标记基因 , 可以方便高效地筛 ( ) 选转基因植物 。目前经初步筛选获得了约 10 000 个独立转化株系 T1 代 , 其中约 50 个株系具有明显的 表型变化 , 包括花期改变 、株型变异 、叶形特异 、育性降低 、花发育异常 、种子颜色变浅等 。运用 TA IL PCR 技术 , 成功获得了其中 10 个表型特异株系的 TDNA 侧翼序列 , 分别分布于拟南芥基因组的 5 条染 色体上 。 关键词 : 激活标签法 ; 拟南芥 ; 突变体 ; TA ILPCR 中图分类号 : Q 945 , Q 75      文献标识码 : A       文章编号 : (20 10) 0 105307 Constructing and Phenotypic Analyzing an Activation Tagging A rabi d op s is Mut ant Pool GU AN YanLon g1 , L I WanSha2 , YIN KuiDe1 , YAN G Yo ngPin g2 , HU XiangYang2 ( 1 Col leg e of L if

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