FL09 03细胞破碎.pptVIP

知识点： 细胞壁的组成和结构，微生物细胞的破碎技术，破碎率的测定。 重点：工业生产中常用的几种细胞破碎方法的原理，操作过程常用设备。 难点：常用破碎方法的合理选用。 概 述 一些微生物在代谢过程中将产物分泌到细胞外的液相中（称胞外酶），这些产品主要为医药和保健产品，如胰岛素、某些细胞因子和疫苗亚单位成分等。 这些蛋白质在细胞培养时被宿主细胞分泌到培养液中，提取过程只需直接采用过滤和离心进行固-液分离，然后将获得的澄清滤液再进一步纯化即可。其后续分离和纯化都相对简单。 但由于一些重组DNA（rDNA）产品结构复杂，必须在细胞内组装来获得生物活性，如果在培养时被宿主细胞分泌到培养液中，其生物活性往往有所改变，此类rDNA产品是细胞内产品（非分泌型），需要应用细胞破碎技术破碎细胞，使细胞内产物释放到液相中，然后再进行提纯，为后续的分离纯化做好准备工作。 概 述 胞外产品：各种胞外酶、胞外多糖、细胞代谢物 细胞本身：单细胞蛋白（SCP） 胞内产品：碱性磷酸酯酶，基因工程产物，植物细胞产物等 什么是细胞破碎技术？ 细胞破碎（cell rupture）技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁，使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术。 细胞破碎技术是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质（产品）的基础。 随着重组DNA技术和组织培养技术上的重大进展，以前认为很难获得的蛋白质现在可以大规模生产。