GmHSFA1基因克隆及过量表达提高转基因大豆耐热性.pdfVIP

遗 传 HEREDITAS (Beijing) 28(11): 1411~1420, 2006 研究报告 DOI: 10.1360/yc-006-1411 GmHSFA1 基因克隆及其过量表达提高 转基因大豆的耐热性 1,2 1,3 1 1 1 陈晓军 , 叶春江 , 吕慧颖, 徐民新 , 李 葳 , 张利明1 1 2 1 , 王 超 , 罗淑萍, 朱保葛 (1. 中国科学院遗传与发育生物学研究所, 北京 100101; 2.新疆农业大学农学院, 乌鲁木齐 830052; 3.济南大学化工学院生物技术系, 济南 250022) 摘 要: 热激转录因子在调节植物对逆境胁迫应答和热激蛋白基因表达方面起重要作用。采用生物信息学和比较基 因组学方法结合RACE 技术从大豆基因组中克隆到一个新的热激转录因子基因 GmHsfA1, 其 cDNA 全长 1 781 bp, 包 含 1 个 1 533 bp 的开放阅读框, 编码含有 510 个氨基酸残基的蛋白质(GenBank 登录号为 AY458843) 。与其他转录因 子的分子结构相似,GmHSFA1 也含有 4 个典型的结构功能域—DNA 结合域、寡聚域、核定位信号和 C 端激活域。 BLAST 分析表明, GmHSFA1 与其同源性最高的番茄热激转录因子 LpHSFA1 之间的氨基酸序列相似性为 52.46% 。 RT-PCR 、Northern 和遗传转化结果显示: 1)GmHsfA1 在大豆的不同组织中呈现组成型表达模式; 2)常温下转基因大豆 植株的 GmHsfA1 表达水平明显高于非转基因对照; 3)GmHsfA1 的过量表达激活了转基因大豆植株中热激蛋白基因 GmHsp22 在非诱导条件下的转录, 并加强了高温胁迫下另 2 个热激蛋白基因 GmHsp23 和 GmHsp70 的表达; 4)转 GmHsfA1 大豆植株的耐热温度(达 52 ℃) 明显高于非转基因植株。上述结果说明, GmHsfA1 的过量表达激活或促进其 下游 3 个热激蛋白基因的转录或表达, 明显提高了转基因大豆植株的耐热能力。 关键词: 大豆; 热激转录因子 A1(HSFA1); 转基因; 热胁迫; 过量表达; 耐热性 中图分类号: Q943.2 文献标识码: A 文章编号: 0253-9772(2006)11-1411-10 Cloning of GmHSFA1 Gene and its Overexpression Leading to En- hancement of Heat Tolerance in Transgenic Soybean