第五章 微生物基因工程育种.pptVIP

第五章  工业微生物基因育种 目的与要求 了解和掌握基因工程育种的原理与方法； 了解基因工程的主要载体与基因定位诱变的原理与方法。 教学重点：质粒的特性与基因工程操作原理 教学难点：基因定位诱变的原理 教学内容 1、概述 基因工程在微生物育种中的地位和作用，原理 2、基因工程载体 几种常见的载体 3、基因工程所用的酶 限制性内切酶，核酸酶，连接酶，聚合酶等 4、基因工程的主要步骤 5、基因定位诱变 The transforming principle is DNA. 基因工程流程示意图 3,改良工业酶生产菌株:蛋白酶,木糖异构酶,纤维素酶,葡萄糖淀粉酶以及凝乳酶等均进行了研究.研究较多的是α-淀粉酶和青霉素酰化酶. 1981年起,在枯草杆菌或大肠杆菌中克隆和表达了来自枯草杆菌,淀粉液化芽孢杆菌,凝结芽孢杆菌,嗜热脂肪芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌等菌种的α-淀粉酶基因,比野生株最高的可达30倍.目前美国已用基因工程菌生产. 德国首先克隆大肠杆菌青霉素G酰化酶基因.我国青霉素G酰化酶的产量可达3000单位/L以上. 三、基因工程原理和步骤 一),目的基因的取得:①选择适宜的给体细胞,从中采集分离有生产意义的目的基因;②通过反转录酶的作用由mRNA合成cDNA(互补DNA);③用化学方法合成特定功能的基因. 二),选择载体: