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高效液相色谱法联合测定新生儿血中苯丙氨酸和酪氨酸的应用(现代预防医学.实验技术及其应用)内容酪氨酸血症 酪氨酸血症是因酪氨酸代谢过程中酶的缺陷所引起的先天性氨基酸代谢异常的疾病，属于常染色体隐性遗传性疾病。饮食中摄入的蛋白质酪氨酸二氧化氮水一系列酶的作用苯丙氨酸代谢合成高苯丙氨酸血症 高苯丙氨酸血症是一种常见的遗传代谢病，由于苯丙氨酸羟化酶（PAH）活性降低或丧失使人体摄入的苯丙氨酸出现代谢紊乱所造成，当体内苯丙氨酸血浓度高于2 mg／dl时统称为高苯丙氨酸血症。 利用高效液相色谱测定新生儿血中苯丙氨酸、酪氨酸以及苯丙氨酸和酪氨酸的比值可以诊断和鉴别诊断高苯丙氨酸血症和酪氨酸血症。通过对489例正常新生儿的测定统计 苯丙氨酸正常参考值范围为0.13～1.93 mg／dl 酪氨酸正常参考值范围为0.4～2.44 mg／dl 苯丙氨酸／酪氨酸正常参考值为0～1.81文献中测定苯丙氨酸和酪氨酸含量及其比值的具体方法样品前处理: 血清，加高氯酸水溶液（去蛋白），高速离心，上清液经微孔滤膜过滤，加入样本瓶待测。制作标准曲线 以苯丙氨酸、酪氨酸为标准品,配置3种不同浓度浓度的标准液,将3种浓度的标准液用HPLC色谱柱分离后，根据峰面积和浓度做直线相关曲线。计算苯丙氨酸、酪氨酸的浓度 根据待测样本的峰面积得出样本苯丙氨酸、酪氨酸的浓度，然后计算苯丙氨酸和酪氨酸的浓度比值。 标准品的色谱图 正常婴儿苯丙氨酸和酪氨酸的色谱图 苯丙酮尿症患儿的色谱图标准品的色谱图苯丙氨酸phe酪氨酸tyr正常婴儿苯丙氨酸和酪氨酸的色谱图酪氨酸tyr苯丙氨酸phe苯丙酮尿症患儿的色谱图酪氨酸tyr苯丙氨酸phe精密度试验将3个不同样本的血清收集保存，每天上午测定1次，连续测定30次，计算每个样本浓度的平均值、SD与CV见表1。精密度试验的结果 高浓度标本测定变异系数稍高于低浓度标本，但均在10%以内，测定方法的精密度符合本实验室对实验方法精密度的要求测定新生儿血中苯丙氨酸和酪氨酸的方法的比较方法原理优点缺点高效液相色谱法物质在固定相和流动相之间的分配系数不同不但能用于可以阳性患儿的诊断，对于某些临床实验室也可用于高危个体的筛查。操作简单，特异性和精密度高，常规实验室可以开展此种方法用于临床。时间分辨荧光法谢谢大家敬请老师和各位同学批评指正
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