乳腺癌干细胞上皮-间质转化标志物表达变化及意义.pdfVIP

用癌症杂志2010年3月第25卷第 2期 ThePracticalJournal—ofC—aner Q， 堑 ： 乳腺癌干细胞上皮．间质转化标志物表达变化及意义 孙正魁 马行天 唐 华 姚榛祥 【摘要】 目的 探讨乳腺癌干细胞上皮一间质转化标志物表达变化及其临床意义。方法 采用无血清悬浮培养法， 从MCF-7细胞培养乳腺癌微球体细胞 ，应用流式细胞仪检测微球体细胞中CD44和 CD24的表达，采用Westernblot方法 检测微球体细胞中E．钙黏素、N．钙黏素、纤维连接蛋白、波形蛋白的表达水平，体外穿膜实验检测肿瘤细胞的迁移、侵袭 能力。结果 乳腺微球体富集了CD44CD24一的乳腺癌干细胞，并能在含血清培养基中增殖分化。该微球体细胞的上 皮标志物E．钙黏素表达水平下调，而间质标志物N一钙黏素、纤维连接蛋 白、波形蛋白的表达水平上调，同时乳腺癌干细 胞的迁移、侵袭能力显著增强。结论 乳腺癌干细胞具有上皮一间质转化的特征，具有显著增强的迁移、侵袭能力。 【关键词】 乳腺癌；干细胞；上皮一间质转化 中图分类号：R737．9 文献标识码：A 文章编号：1001-5930(2010)02-0118-04 TheSignificanceandExpressionofM arkersofEpithelial—mesenchymal TransitioninBreastCancerStem Cells SUNZheng—kui，MA 一tian，TANGHua，eta1． BreastCancerCentre，JiangxiProvincialCancerHospital，Nanchang，330029 A【bstract】 Objective Tostudytheexpressionsofmarkel~ofepithelial-mesenehymaltransitionnadpotentialofmigra· tionandinvasioninhumanbreastcancerstem cel1．Methods MCF-7ceBswereseededinselum—freemedium supplemented withbFGFnadEGFtoform spheres．AftertheMCF-7breastcnacerspheresformed．theyweredissociatedandpassagedperiodi- eallyandwerealsoinducedtOdifferentiateinthemedium withFBSsupplemented．TheexpressionsofCD24andCD44were de— tectedwitlIhteflow—cytometrieanalysisandtheexpressionsofE—cadherin，N-cadherin，FibrenectinandVimentinweredetected withWesternblotinthesecells．CelimigrationandinvasionwerealsodetectedwitIlTranswellassays．Results Thebreastcnacer sphereswere generatedinserum—freemedium andMCF-7spheresCna alsobeinducedtodifferentiateinmedium witllFBSsup- plemented．There were74．6％ CD44 CD24一cellsinMCF-7spheresceils．Th eexpressionofE—cadherininspheresee]]sWas significnatlyhigherthaninMCF-7cellbuttheexpressionofN-cadherin，FibronectinandVimentininspheresceHswassignifi- cnadylowerthna inMCF-7cel1．Meanwhile，thepotentialofmigrationandinvasioninspherescellsincre