活络育阴方对糖尿病性脑梗死大鼠脑组织RAGE表达的研究.pdfVIP

活络育阴方对糖尿病性脑梗死大鼠脑组织 RAGE 的表达研究1 1 2 2 2 3 2 ＊ 李丰衣 ，李福荣 ，张继国 ，朱良珍 ，祝世功 ，孙保亮 1．中国人民解放军第三○二医院，北京（100039 ） 2．泰山医学院，山东泰安（271016 ） 3．北京大学医学部，北京（100083 ） 摘 要：目的：建立糖尿病性脑梗死SD 大鼠模型，观察对比RAGE 在糖尿病性脑梗死大鼠 模型中的表达及活络育阴方对其的影响。方法：选 SD 大鼠以高脂高糖饮食，腹腔注射链脲 佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病模型。在此基础上再用线栓法制作大脑中动脉栓赛（MCAO ） 模型。利用形态学等方法，观察不同剂量和不同时间活络育阴方对糖尿病性脑梗死的脑保护 作用；用 ABC 免疫组化方法观察活络育阴方对糖尿病性脑梗死模型大鼠脑损伤后高级糖基 化终产物受体（RAGE ）的影响，探讨其疗效机制。结果：以高糖高脂饮食，注射STZ，用 线栓法制作 MCAO ，大鼠糖尿病模型和糖尿病性脑梗死模型均可复制成功。糖尿病＋脑梗 死组 RAGE 阳性细胞与单纯糖尿病组比较明显增多。在活络育阴方治疗 1 组、2 组中，2w 、 4w 两个治疗时段 RAGE 均明显降低。结论活络育阴方通过下调 RAGE 表达，对糖尿病性 脑梗死大鼠的神经损伤起到保护作用。 关键词：RAGE；糖尿病；脑梗死 中图分类号：R743 文献标识码：A 糖尿病性脑梗死是糖尿病致死、致残的慢性并发症之一。据统计，糖尿病人 25%死于 脑血管病[1] [2] 。糖尿病性脑血管病变的发生率是非糖尿病人的3 倍以上 。在我国脑血管病变 造成糖尿病患者致残和死亡的问题远比西方国家严重。 本实验首先通过高糖高脂饮食、注射低剂量STZ 和线栓法行MCAO 后成功复制糖尿病 并发脑梗死动物模型。然后应用养阴补肾、活血化瘀法，应用活络育阴方对糖尿病性脑梗死 动物模型进行其对RAGE 影响的研究。 1. 实验一、建立糖尿病性脑梗死模型 1.1 糖尿病模型的建立 1.1.1 实验动物及分组 SD 大鼠60 只，清洁级，雌雄各半，周龄6 周，体重 180~230g，由山东大学医学院实 验动物中心提供（鲁动质字04102 ）。适应喂养一周，随机分为3 组：A 组(普通饲料喂养组 即对照组)12 只；B 组(高脂高糖饲料喂养组即肥胖组)24 只；C 组(高脂高糖饲料喂养后STZ 注射组即模型组)24 只。所有大鼠12h 光照，单笼饲养。 1.1.2 实验饲料 普通饲料：由标准粉、麸皮、鱼皮粉等组成；高脂饲料：每 100g 饲料中含标准粉 1715g、 大豆粉1010g、麸皮710g、玉米粉1210g、鱼粉215g 、食盐015g、酵母粉015g、猪油1510g、 蔗糖 1010g、奶粉510g、麻油510g、鸡蛋1010g、花生510g 。饲料由江苏省协同医药生物 工程责任有限公司提供(苏A 饲监 。 1.1.3 主要试剂 甘油三酯(TG)试剂盒；北京福瑞生物工程公司生产，批号：040702 ；血清游离脂肪酸 1本课题得到山东省中医药科研基金资助课题（项目编号：2003-017 ）的资助。 - 1 - (NEFA)试剂盒：南京建成生物工程研究所生产，批号：040630 ；总胆固醇(TC)试剂盒：北 京福瑞生物工程公司生产，批号：040702 ；胰岛素放射免疫分析盒：解放军总医院科技开发 中心放免所生产，批号：200427225 ；链脲佐菌素(STZ) ：美国 Sigma 公司生产。柠檬酸 (CH6H8O71H2O) ：开封化学试剂