缺氧诱导因子-1α在缺氧预处理预防心肌细胞损伤中作用.pdfVIP

生理学报 Acta Physiologica Sinica , October 25, 2004, 56 (5): 609-614 609 研究论文 缺氧诱导因子 -1α 在缺氧预处理预防心肌细胞损伤中的作用 * 徐菲菲, 刘秀华 , 蔡莉蓉 中国人民解放军总医院基础医学研究所病理生理研究室, 北京 100853 摘 要: 本工作旨在研究缺氧预处理(hypoxic preconditioning, HPC)对于心肌细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinases, ERK)活性、缺氧诱导因子 -1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)表达的影响，及其在缺氧复氧诱导心肌 细胞损伤中的作用。通过在培养的 SD 乳鼠心肌细胞缺氧/ 复氧(H/R)模型上, 观察 HPC 对于 24 h 后H/R 诱导心肌细胞损伤的 影响, 以台盼蓝排斥实验检测心肌细胞存活率、以TUNEL 法检测细胞凋亡、并用荧光素染料 Hoechst33258 测定心肌细胞 凋亡率; 制备心肌细胞蛋白提取物，以磷酸化的 ERK1/2 抗体测定 ERK1/2 活性, 以抗HIF-1 α 抗体检测 HIF-1 α 的表达，并 观察 ERKs 的上游激酶(MEK1/2)抑制剂 PD98059 对于 HPC 诱导的 ERKs 磷酸化、HIF-1α 表达以及心肌细胞保护作用的影响， 并分析细胞损伤与 ERK1/2 活性、HIF-1 α 表达量之间的相互关系。结果显示缺氧复氧造成心肌细胞损伤, HPC 可以增加心 肌细胞 H/R 后存活率，降低凋亡率，并激活 ERK1/2 ，诱导HIF-1 α 表达；细胞凋亡与 ERKs 活性、HIF-1 α 表达量之间存 在负相关，即 ERKs 活化、HIF-1 α 表达与预防细胞损伤有关；而 ERKs 活性与 HIF-1 α 表达量之间存在正相关，ERKs 的 上游激酶MEK 抑制剂 PD98059 可以消除HPC 诱导的 ERKs 磷酸化、HIF-1α 表达和心肌细胞保护作用。由此得出的结论是 HPC 可以提高乳鼠心肌细胞对于 H/R 的耐受性，其机制涉及ERKs 介导的 HIF-1 α 表达。 关键词: 缺氧诱导因子 -1α; 缺血预处理; 细胞凋亡; 心肌细胞 中图分类号: Q463; R541.4 Role of hypoxia-inducible factor-1α in the prevention of cardiomyocyte injury induced by hypoxic preconditioning * Xu Fei-Fei, Liu Xiu-Hua , Cai Li-Rong Department of Pathophysiology, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100853, China Abstract: In order to understand the intracellular mechanism of preconditioning, we investigated the relationship among activities of extracellular signal-regulated protein kinases (ERKs), the expression of hypoxia-inducible factor -1α (HIF-1α) and the effect of hypoxic preconditioning (HPC) on cell injury induced by hypoxia-reoxygenation in cultured neonatal rat cardiomyocytes 24 h after brief hypoxia. Cultured cardiomyocytes of neonatal Sprague-Dawley rats were divided into four groups: hypoxia/reoxygenation (H/R), hypoxia preconditioning (HPC), hypoxia precondi