反胶束萃取分离生物分子及相关领域研究进展.pdfVIP

( ) 第 30 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　评述与进展 第 3 期 　 　　　　　　　　　　 　 　　　　　　　　　　 2002 年 3 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 365～371 反胶束萃取分离生物分子及相关领域的研究进展 段金友　方积年 ( 中国科学院上海药物研究所 ,上海 200031) 摘 　要 　综述了反胶束有关的概念、理论 ;反胶束萃取蛋白质的传质机制、选择性分离过程及工艺流程 ;反胶 束对氨基酸、抗生素及核酸的萃取分离 ;反胶束与其他方法、技术相结合的应用状况。 关键词 　反胶束 ,萃取 ,分离 ,评述 1 　引　　言 传统的液液萃取分离技术成本低 ,易于运作 , 已广泛用于多组分物质的分离。但是, 由于缺乏相应 的生化溶剂 ,采用该技术难以分离蛋白质、核酸等大分子生物活性物质 ;液相色谱技术 ,特别是制备型色 谱技术的应用 ,使大多数生物分子的批量分离成为可能 ,然而由于该技术本身也存在某些局限性 ,例如 一定的固定相 ,有时会引起目标物的不可逆吸附、甚至变性等现象 ,在一定程度上限制了其在生化工程 中的应用。近年来 , 以反胶束溶液为新的溶剂系统的萃取分离技术,可以选择性分离某些生物活性分 子 ,而逐渐引起了人们的重视。 1 ( ) 1977 年Luisi 等 首先发现胰凝乳蛋白酶可以溶解于含双亲物质 表面活性剂 的有机溶剂中 ,超离 ( ) 心数据显示有机相中有反胶束的存在 , 同时 ,光谱分析 紫外可见光谱、荧光光谱、旋光光谱 表明这一 2 过程未引起酶的变性 ;1979 年Luisi 等 考察了蛋白质溶液的 pH 值、蛋白质和双亲物质的浓度对蛋白 质萃取率的影响及蛋白质在反胶束溶液中的光谱特性 ;1979 年 Menger 和 Yamada 3 对反胶束溶液中酶 的性质进行了研究。随后的20 多年里 ,反胶束萃取技术已广泛应用于蛋白质的分离和纯化 ,并逐渐延 ( ) 伸至其他生物分子 氨基酸、抗生素、核酸 的分离研究;近年来 ,该技术结合其他一些技术、方法的应用 正在研究和开发 ,显示了良好的应用前景。 2 　反胶束的定义 、形成条件、特征和研究方法 ( ) 反胶束 reversed micelle 是双亲物质在非极性有机溶剂中自发聚集体 , 又称为反胶团、逆胶束 (inverse micelle) 4 ,5 。双亲物质的这种胶团化过程的自由能变化主要来源于双亲分子之间偶极子偶极 子相互作用 ,除此之外 ,平动能和转动能的丢失以及氢键或金属配位键的形成等都可能参与这种胶团化 过程6 。 通常 ,形成反胶束体系的有机溶剂为脂肪烷烃 ;双亲物质根据其极性头基性质的不同 ,可分为以下 ( ) ( ) 4 种类型 :非离子型 如脂肪醇聚氧乙烯醚 ,Brij 30 ,阳离子型 如丁二酸二2乙基己基酯磺酸钠 ,AOT , ( ) ( ) 阴离子