羧甲基壳聚糖微球固定化AS1_398中性蛋白酶的制备和性质研究.pdfVIP

生物医学工程学杂志 　2006; 23 ( 1) ∶97～ 101　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 J B iom ed Eng 羧甲基壳聚糖微球固定化AS1. 398 中性 蛋白酶的制备和性质研究 1 1 1 1 1 1, 2 晋治涛 　陈国华 　刘晓云 　赵　育 　陈　尧 　高从土皆 1( 中国海洋大学 化学化工学院, 青岛　266003) 2 ( 国家海洋局杭州水处理技术研究开发中心, 杭州　310012) 　　摘要　以戊二醛为交联剂, 制备羧甲基壳聚糖微球固定A S 1. 398 中性蛋白酶。研究了羧甲基壳聚糖固定化酶 微球的制备条件、固定化酶的适宜温度、 、米氏常数和储存稳定性等性质。结果表明, 在 = 7. 0 的中性环境下; pH pH 交联剂与羧甲基壳聚糖摩尔比为0. 4 ∶1; 干酶与羧甲基壳聚糖的质量比为0. 125 ∶1; 在室温下交联至少4 h , 便可得 到活力相对较高的固定化酶。自由酶和固定化酶的最适宜温度分别为40 ℃和65 ℃, 在70 ℃下, 固定化酶的热稳定性 比自由酶要好。 自由酶和固定化酶的最佳pH 分别为7. 0 和6. 0, 固定化酶具有较宽的酸碱稳定性, 在pH 6～ 8 都保 持较高活力。固定化酶在5 ℃和35 ℃下储存1 周后酶相对活力分别为97. 6% 和85. 1% , 而没有被固定的自由酶在5 ℃ 下储存 1 周酶相对活力仅为61. 3% 。 自由酶和固定化酶的 分别为566 和 104 。 Km g L g L 关键词　固定化酶　 1. 398 中性蛋白酶　羧甲基壳聚糖　戊二醛 A S Stud ies on the Prepara tion and Character iza tion of Imm obilized Neutra l Protea se by Carboxym ethyl Ch itosan M icrosphere 1 1 1 1 1 1, 2 　 　 　 　 　 J in Zh itao Chen Guohua L iu X iaoyun Zhao Y u Chen Yao Gao Congj ie 1( , 　266003, ) D ep artm ent of C