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茶多酚抗氧化机理研究现状(一)
胡秀芳 沈生荣 朴宰日 杨贤强
摘要 茶多酚是茶叶中的一种主要活性成份,有着独特的抗氧化效果。其抗氧化机理表现在6个方面:作用于自由基有关的酶,直接作用于自由基,络合金属离子,再生体内高效抗氧化剂,与其他成份协同增效和调节机体免疫力。文中对此进行了综述。
关键词:茶多酚 抗氧化 机理 中图分类号:TS202.3 文献标志码:A
.... 茶多酚是茶叶的一种活性成分,其组成除酚酸外,主要是以α- 苯基苯并吡喃为结构基础的类黄酮化合物,其中羟基取代基作为质子的供体[1],使其具有特殊的生理功能,主要表现在抗衰老、抗肿瘤、抗辐射、抗菌等方面[2]。研究表明[3],茶多酚的这些功能与其清除自由基的抗氧化效果密切相关。体内、外试验表明茶多酚是一种强抗氧化剂。茶多酚对食用油脂的抗氧化能力为维生素E、BHT、BHA的3~9倍[4]。奥田拓男[5]以大白鼠肝线粒体和微粒体模拟体内脂质过氧化试验,结果EGCG的抑制效果比维生素C和维生素E高18倍和16倍。可见,茶多酚的抗氧化作用比维生素C和维生素E强。... 茶多酚抗氧化作用的机理,国内外都有研究。总体上讲,氧化和络合是抗氧化的两个主要要素,这两个要素发挥抗氧化作用的途径归纳起来有如下6个方面:
1 茶多酚作用于与自由基有关的酶
....已经知道,生物体内自由基处于生物生成体系与生物防护体系的平衡之中,该两大体系均可由酶调控[6]。用重金属Cd饲喂小鼠若干天后,检查鼠肝发现,同时喂绿茶组的肝中自由基生成酶——黄嘌呤氧化酶活性下降,而自由基清除酶——SOD、GSH-Px、过氧化物酶和GSH-S-转移酶活性提高,认为茶多酚可通过强化抗氧化解毒系统的作用,清除用Cd处理大鼠肝中的Cd和减轻过氧化损伤[7]。这就是茶多酚调节生物体内自由基平衡的结果。
1.1 抑制氧化酶系
....生物体内许多氧化酶与自由基生成有关。黄嘌呤氧化酶系(XO):缺血时,ATP逐步降解为ADP、AMP、腺苷,最后形成次黄嘌呤;另外,在Ca2+依赖性蛋白酶作用下黄嘌呤脱氢酶转变为黄嘌呤氧化酶,进而形成尿酸和[8]。ESR技术观测表明,缺血再灌注的最初数秒钟内,自由基爆发性增强可能就是由这一途径产生的[9]。其次,P-450酶系、髓过氧化物酶、脂氧化酶和环氧酶均可催化体内自由基的生成[10]。
已有实验证明:茶多酚对上述各种氧化酶均有抑制作用。Cho Y. J.等[11]发现韩国绿茶的丙酮提取液能抑制黄嘌呤氧化酶活性,其中酯型儿茶素比简单儿茶素对XO有更强的抑制活性。
.... 茶多酚对细胞色素P-450的抑制作用研究较多。人工诱变致癌的研究表明[12]:茶多酚可抑制肿瘤细胞中NADPH-细胞色素还原酶及细胞色素P-450活化系统的活性。茶多酚及其单体——EC、EGC、ECG、EGCG对动物肝脏的P-450酶系活性有抑制作用,这种抑制作用被发现是茶多酚及其衍生物与肝脏细胞色素P-450反应,并抑制了皮肤和肝脏中与P-450依存的混合功能氧化酶类的结果[13]。进一步的实验证明了这一观点:将上述单体加入到用苯巴比妥酸处理大鼠的肝微粒,导致了光谱学变化——最大吸收波长在400 nm,最小吸收在380 nm,这是典型的模式Ⅱ结合(反模式Ⅰ)[14]。可见茶多酚对P-450酶具有显著的抑制作用。Wang Z.Y.等[14]研究发现,儿茶素单体(EC、EGC和EGCG)对P-450及相关的芳烃基氧化酶、香兰素去乙基酶和吩哦唑脱乙基酶有抑制作用,从而有效地减低体内芳烃自由基浓度。 TPA(12-o-tetradecanoylphorobol-13-acate) 对老鼠耳皮肤诱导的中性细胞的浸润过程中产生一种天然发生的组分——髓过氧化物酶,在TPA对小鼠耳皮肤点施前用TP处理可以使组织中髓过氧化物酶活性明显降低[15]。
....茶多酚对体内、外脂氧化酶和环氧酶的抑制作用均较明显[16,17]。Jiro Sekiya等[18]对这种抑制机理在体外用大豆脂化酶与ECG、EGCG的作用过程进行了探讨,认为ECG和EGCG对脂质过氧化酶的络合沉淀作用是主要的机制。多酚类沉淀酶的能力以它与被沉淀的酶的重量比表示,比值与沉淀能力成反比。在pH4~7范围内,使50%的脂氧化酶沉淀的EGCG/LOX(重量比)值为5,远远高于高分子单宁——gelatinpersimmontannis和β-glucosidase-chinese sumac的相应值,分别为0.3~0.6和0.1。沉淀后的酶活性下降10%~30%,用聚乙烯吡咯烷酮和吐温20透析解吸后酶的稳定性低于初始酶活,说明EGCG和ECG改变了该酶的性质。EGCG还可沉淀酵母细胞的醇脱氢酶。其他试验也证明了茶多酚能抑制脂肪氧化酶,5×10-5 mol/L茶多酚
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