细胞生物学实验-免疫荧光观察细胞骨架.pdfVIP

细胞骨架的免疫荧光标记及定位观察 免疫荧光技术 免疫荧光技术（Immunofluorescence technique）又称荧光抗体技术，是标记免疫 技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来 的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗 原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进 行标记并获得成功。 根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗体标记上荧光素，制成荧光抗体，再 用这种荧光抗体作为探针检测组织或细胞内的相应抗原。荧光素在一定条件下可与 抗体分子结合同时不影响抗体免疫活性的特性。用荧光抗体浸染可能含抗原的细胞 或组织切片，如有相应抗原存在，则抗原与标记抗体特异性结合，形成的免疫复合 物固定于细胞上，不易洗脱，在荧光显微镜下可以观察到发出荧光的可见物体，从 而可以对抗原或抗体的性质进行定性、定量和定位分析。常用的荧光素有异硫氰酸 荧光素（FITC）和罗丹明（Rhodamine）等。 免疫荧光的应用范围极其广泛，可以用于内分泌激素、蛋白质、多肽、核酸、 神经递质、受体、细胞因子、细胞表面抗原、肿瘤标志物、血药浓度等各种生物活 性物质的研究。 免疫荧光技术的主要特