不同TNM分期恶性肿瘤患者外周血CD+CD+CD-调节性T细胞的研究.docVIP

不同TNM分期恶性肿瘤患者外周血 CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的研究 康文喜 樊静 王小聪 河北省秦皇岛市肿瘤医院 邮编：066004 　 摘要： 目的 探讨不同TNM分期恶性肿瘤患者外周血CD4 +CD25+CD127-调节T细胞变化(P 0. 05) , CD4 /CD8比值低于对照组,差异有显著的统计学意义(P 0. 01) ；III、Ⅳ 期病人CD4+细胞及CD4/ CD8比值均明显减低, 差异有显著性意义(P 0. 01) ;各期肿瘤患者CD3+、CD8+、CD19+ 细胞与对照组比较无显著性差异(P 0. 05)。结论：恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+ CD127-调节性T细胞占CD4+T细胞比率的升高与恶性肿瘤临床分期密切相关，定期检测外周血中上述指标的变化, 有利于了解恶性肿瘤患者的病情变化及预后，下调该比例或许是一种有效的治疗肿瘤的新方法。 关键词 恶性肿瘤 CD4+CD25+CD127-调性T细胞 淋巴细胞亚群 流式细胞仪 CD4+CD25+调节性T细胞（regulatory T cell Treg）是一类重要的免疫调节细胞，免疫抑制性调节作用是其典型的功能特征，在维持机体免疫平衡、预防自身免疫性反应和疾病的发生中发挥关键作用。研究表明，Treg与肿瘤免疫耐受机制相关，许多肿瘤外周血和肿瘤组织局部调节性T 细胞增高[1-12]。本研究利用流式细胞术对比分析不同TNM分期的恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞亚群及Treg变化，探讨其与肿瘤病情及临床转归的关联性。 材料与方法 1.1 研究对象 179例患者为200年2月至20年月住院患者，男例，女例；年龄36～72岁，平均（52±9.8）岁经病理学证实且不伴有自身免疫性疾病。例：腺癌例，黏液癌例，未分化癌例临床分期：Ⅱ期例、Ⅲ期例、Ⅳ期例。2K抗凝，使用直接免疫荧光标记法标记细胞并进行流式细胞分析：简言之，取不同荧光标记的单克隆抗体各2 0μl加入100μl EDTA-2K抗凝的外周血，室温下孵育15min，再加入红细胞裂解液孵育10 min，加入PBS 500μl洗两次，离心弃上清加入PBS 500μl混匀后上机检测。　 CD4+ CD25+CD127-占CD4+T细胞水平明显升高,Ⅳ期患者尤其明显，统计学有显著差异(P 0. 01)。 2.2 不同TNM分期的恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群分析：Ⅰ、Ⅱ期患者CD4+阳性细胞比例低于对照组，差异无显著性意义（p﹥0.05）。CD4/CD8比值低于正常组，差异有明显差异（p＜0.05）；Ⅲ期和Ⅳ期患者外周血CD4+、CD4/CD8比例均明显降低，差异有显著性意义（p＜0.01）；各期患者CD3+ 、CD8+、 CD19+细胞亚群与对照组无显著性差异（p﹥0.05）。 表1 不同TNM分期恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞群分析（.x ±s） 分 组 N CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ CD19+ 、 CD4+CD25highCD127-占CD4+T% 对 照 30 72.03±90.3 42.56 ±9.65 27.50 ±6.66 1.92 ±0.30 10.67±6.16 4.14±0.85 ⅠⅡ期 67 68.55 ±13.50 38.50 ±13.99 27.56 ±8.45 1.60 ±0.65* 10.04±6.57 4.04±0.70 Ⅲ期 73 68.55 ±12.04 34.65±7.52** 8.85 ±8.96 1.06 ±0.63** 10.23±7.80 4.22±0.82** Ⅳ期 39 68.50 ±7.89 36.02 ±8.06** 29.56 ±9.05 0.84 ±0.33** 10.06±9.01 5.87±1.68** 注:与正常对照组比较 * P 0. 05；** P 0. 01 3 .讨　论 调节性T细胞(regulatory T cell，Treg)一类具有免疫抑制作用的T细胞胸腺IL-2受体α链[]、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体（glucocorticoid-induced TNFreceptor）、GITR和细胞毒性T 淋巴细胞相关抗原－4（cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4，CTLA-4）、还表达一种独特的细胞核内蛋白-Foxp3。Treg能抑制免疫反应, 防止自身免疫的发生, 诱导免疫耐受, Treg 在生理和病理状态下均有重要的免疫调节作用[2,3] 。Treg细胞具有低反应性与免疫抑制性两大功能特征。在体内发挥免疫调节、维持自身免疫耐受中发挥着决定性作用，其数量、定位及功能的异常与机体的自身免疫性疾病