不同破壁方法对大肠杆菌DNA提取的影响[].docVIP

不同破壁方法对大肠杆菌DNA提取的影响[1].txt——某天你一定会感谢那个遗弃你的人，感谢那个你曾深爱着却置之你不顾的人。做一个没心没肺的人,比什么都强。________舍不得又怎样到最后还不是说散就散。.. [ 收稿日期] .. 2009.. 12..14; 2010..03..27 修回 .. [ 作者简介] .. 丁小云( 1983- ) , 女, 在读硕士, 研究方向: 植物营养学。E..mail: dingxiaoyun654321@ 126. com .. * 通讯作者: 魏成熙( 1950- ) , 男, 教授, 硕士生导师, 从事土壤肥力与作物生产方面的教学及研究工作。 [ 文章编号] 1001..3601( 2010) 04..0242..0149..02 不同破壁方法对大肠杆菌DNA 提取的影响 丁小云1 , 耿俊丽2 , 魏成熙1* ( 1. 贵州大学农学院, 贵州贵阳550025; 2. 福建师范大学生命科学学院, 福建福州350000) .. .. [ 摘.. 要] 为了解不同细胞破壁方法对大肠杆菌总DNA 提取效果的影响, 分别采用CTAB/ 溶菌酶/ 蛋 白酶K 法、溶菌酶/ SDS 法、CTAB/ SDS 法对大肠杆菌进行破壁提取DNA, 比较了3 种方法从大肠杆菌中提 取DNA 的效果。结果表明: 3 种方法都可以从大肠杆菌中提取到分子量大于21. 2 kb 的DNA 片段, 1mL 菌液DN A 的提取量为14. 3~ 43. 6 ..g, 不同方法间在DNA 产量及纯度等方面存在较大差异。 [ 关键词] 大肠杆菌; DNA; 提取方法 [ 中图分类号] S852. 61+ 2 [ 文献标识码] A Effect of Different Extract methods on DNA Extract Amount from Es cherichia coli DING Xiao..yun1 , GENG Jun..li2 , WEI Cheng..x i1* ( 1. College of Agriculture, Guizhou University , Guiyang, Guizhou 550025; 2. College of Lif e Sciences, Fuj ian Normal University , Fuzhou, Fuj ian 350000, China) .. .. Abstract: T hree differ ent DNA ex t ract ing methods of CT AB/ lyso zyme/ proteinase K lysis, SDS/ lysozyme lysis and CTAB/ SDS ly sis w ere used in ex t ract ing DNA f rom Escher ichia coli to study the effect on DNA ex tr act amount f rom E scheri chia col i . T he result s show ed that each of three tested methods co uld ex t ract DNA f ragment of abov e 21. 2 kb molecular w eig ht f rom Escher ichia col i , 14. 3 ~ 43. 6..g DNA could be ex t racted f rom 1mL E scheri chia col i solut ion, and there w as obv io usly difference in DNA ex t ract amount and purity among three ext ract metho ds. Key words: Escher i chia col i ; DNA; ext raction method .. .. 大肠埃希氏杆菌是肠道的正常菌群, 广泛存在 于土壤、空气、河流和海洋等自然界, 利用其基因组 DNA 通过相应的PCR 和电泳等技术建立基因.. 指 纹库 , 实现粪便污染源示踪, 已成为生物示踪中的 一种有效的方法[ 1] 。作为分子生物学研究的第一 步, 样品DNA 的提取尤为重要。提取DNA 的总 量、成分、纯度、片段大小以及提取方法的偏倚性[ 2] 将对后续工作产生影响。常用的破壁方式主要有物 理法、化学法、酶解法和联合裂解法, 经过人们长期 的研究和总结, 联合裂解法较单独使用某一种方法 破壁提取DNA 的效果好。为寻找一种简便有效的 大肠杆菌DN