乙酰水杨酸对醋酸扭痛模型的镇痛效果和福尔马林实验模拟慢性疼痛.docVIP

乙酰水杨酸对醋酸扭痛模型的镇痛效果和福尔马林实验模拟慢性疼痛（小鼠） 实验目的 小鼠醋酸扭体模型的药物镇痛效力； 福尔马林模拟临床慢性模型的构造。 实验原理 扭痛模型：各种伤害，如醋酸引起的疼痛刺激通过感觉神经纤维传送到脊髓，然后到达大脑皮质产生疼痛感觉。中央和外周镇痛剂舒缓疼痛通过感觉中枢的一体化和抑制或减少疼痛感觉的进入。中枢的止痛很容易通过动物实验证实效果，但一些周边止痛药，如水杨酸的影响不容易确定。 福尔马林实验：甲醛实验能较好的模拟临床慢性疼痛，是一种重要的慢性疼痛模型。文献报道小鼠甲醛实验可分为两个时相，分别是注射甲醛后0-5min内和20-30min，这两个时相引起的疼痛机制不同。第1时相，是刺激伤害性感受器引起的直接效应，能被中枢性镇痛药如吗啡抑制。第2时相，是由前列腺素部分介导的炎症反应，能被非类固醇类抗炎剂、类固醇和中枢性镇痛药抑制。 试剂和仪器 仪器：注射器，注射针头，灌胃针，电子天平，计数器，鼠箱，小鼠解剖基本器材。 试剂：乙酰水杨酸样品（由学生实验制得），乙酰水杨酸标准品（山东鲁抗制药Serial No.1002282013），1.1%醋酸，福尔马林（北京CMF生产），生理盐水。 动物：18-22g小鼠18只（在实验室养3天并在试验前12小时不喂食）。 实验过程 乙酰水杨酸对醋酸扭痛模型的镇痛效果： 取9只小鼠，随机分成3组，每组3只，所有的小鼠用记号笔编号标记(1、2、3为阴性对照组，4、5、6为阳性对照组，7、8、9为测试组)。 向测试组的三只小鼠中，按照1mg/10g比例注射乙酰水杨酸，阳性对照组的小鼠中，按照0.15mg/10g的比例注射，阴性对照组，按照0.2mg/10g的比例注射生理盐水。 上步反应30Min后，向每只小鼠通过腹腔注射1.1%的醋酸，每只0.2ml。 用计数器记下每只小鼠在10min的扭体次数。 5．疼痛抑制百分率用下述公式计算：抑制百分率=（阴性对照组平均扭体数-测试（阳性）组平均扭体数）/阴性对照组平均扭体数*100% 福尔马林实验模拟慢性疼痛： 福尔马林测试：参照醋酸扭体实验步骤(1)和(2)给药，给药后30分钟，自小鼠右后爪足背皮下注射1% 福尔马林 0.2ml。 将小鼠舔、咬右爪的时间长度作为疼痛反应的指示。记录注射福尔马林后0 ~ 5min(第1时相)和15~ 30min(第2时相)反应时间。 注射福尔马林1h后, 将小鼠断头处死, 自膝关节切脚,称重, 比较左右足重量差异。 实验结果： 乙酰水杨酸对醋酸扭痛模型的镇痛效果： 组别 编号 扭体次数（次） 平均（次） 阴性对照组（生理盐水） 1 35 32.5 2 死亡 3 30 阳性对照组（标准品） 4 死亡 33.5 5 27 6 40 测试组（样品） 7 不敏感 25.5 8 24 9 27 结果如上表所示，实验中2、4号鼠分别于腹腔注射1.1%醋酸后5分钟内死亡，注射时未发现血液、尿液、内容物回流至注射器，尸体解剖结果显示肝、肾部位完好，具体死亡原因待进一步验证。7号鼠注入醋酸后无明显反应，实验后处死，尸体解剖结果未见异常。 由实验结果看出，自制阿司匹林获得良好的镇痛效果，其镇痛率为 21.54%，而市售阿司匹林标准品未获得明显结果，可能由于样本量过少而个体差异较大导致，同时表明实验组结果未必精确。同时，由于样本量过少，本结果仅可用于定性，无法进行进一步的统计学验证。进一步分析需通过更大样本量进行验证。 福尔马林实验模拟慢性疼痛： 组别 编号 舔咬右后爪次数（次） 右后爪重量（g） 左后爪重量（g） 左右重量差（g） 平均（g） 0-5min 15-30min 阴性对照组 1 9 1 0.5013 0.6473 0.146 0.2323 2 3 1 0.586 0.7783 0.1923 3 13 0 0.6119 0.9705 0.3586 阳性对照组 4 15 0 0.4519 0.5526 0.1007 0.178967 5 18 0 0.6476 0.7537 0.1061 6 4 0 0.4621 0.7922 0.3301 测试组 7 8 0 0.4887 0.5856 0.0969 0.108533 8 5 2 0.5956 0.6701 0.0745 9 18 0 0.4746 0.6288 0.1542 结果如上表所示：由于计时器本身的原因，未能准确记录小鼠持续啃咬右后爪时间，但可观察到注射福尔马林后一时相中0-2min小鼠多次啃咬右后爪而3-5min啃咬极少，二时相15-30min极少有啃咬右后爪的现象。 而对小鼠左右后爪对比称重的结果显示，阳性对照组（标准品）和测试组组（自制品）左右