中国部分地区麻风菌的基因分型初探.x.docxVIP

中国部分地区麻风菌的基因分型初探中国部分地区麻风菌的基因分型初探中华皮肤科杂志 2000年第0期第33卷 论著作者：吴勤学　尹跃平　张良芬　侯伟　余艳华单位：南京，中国医学科学院　中国协和医科大学皮肤病研究所　210042关键词：分支杆菌；麻风基因型?【摘要】目的探讨我国麻风菌有否基因型的差别。方法用麻风菌基因扩增试验检测我国 有关省份麻风患者病损活检标本中麻风菌的DNA分型。结果检测的9个省中的麻风临床标本16 份，其中有7份标本出现91bpDNA片段，有9份标本出现97bpDNA片段。结论我国麻风菌可能在 基因水平上有株间差异，并且分布在不同地区。Preliminary Investigation of Genotype and Its Distribution of Mycobacterium Leprae Strains in Part of ChinaWU Qinxue　YIN Yueping　ZHANG Liangfen　et al（Institute of Dermatology, Chinese Academy of Medical Sciences ＆ Peking UnionMedical College, Nanjing 210042）【 Abstract】 Objective To explore whether there were differences in genotypes between strains of M.leprae in China or not.　Methods Polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the genotypes of M.leprae in samples from patients withleprosy in different parts of China. Results Out of 16 samples from 9 provinces, 91 bp DNA fragments were present in 7　samples and 97 bp DNA fragments in 9 samples. Conclusion Above? mentioned results suggest the genotyping differences in strains of M.leprae with different distribution in areas of　China.【 Key words】 Mycobacterium leprae Genotype麻风菌分型对判断麻风菌感染的免疫学有重要意义，鼠足垫接种曾发现有生长速度的差别，但由于麻风菌尚不能体外培养，大大地限制了对它的深入研究，当今分子生物学技术的发展使我们有可能从分子水平的高度去了解麻风菌是否有分型及其分型基础，我们用PCR法在我国部分地区麻风患者的活检石蜡包埋组织切片和未经包埋活检标本中做了初步研究，现将所得结果报告如下。材料和方法一、材料(一)受检标本：为麻风患者的石蜡包埋活检组织(经10％中性福尔马林液或70％酒精固定)或70％酒精固定活检组织。其临床状况如表1所示。表1　临床标本状况及其麻风菌基因分型测结果标本号病型BI放大DNA片段(bp)固定剂及标本形式来B2+91－乙醇、蜡块黑龙江省2433MB3+－97乙醇、蜡块辽宁省2434MB1+－97乙醇、蜡块辽宁省Yu XXMB3+91－乙醇、组织匀浆辽宁省99186MB4+－97福尔马林、蜡块山东省99187MB6+91－福尔马林、蜡块山东省97041MB不明91－福尔马林、蜡块江苏省97043MB不明－97福尔马林、蜡块江苏省91048MB5+－97福尔马林、蜡块安徽省9618MB2.8+－97福尔马林、蜡块浙江省96141MB3.6+－97福尔马林、蜡块浙江省2438MB4+91－乙醇、蜡块浙江省9039MB3+－97福尔马林、蜡块福建省7242MB4+91－福尔马林、蜡块广东省4243MB3+－97福尔马林、蜡块广东省2432MB4+91－乙醇、蜡块贵州省合计16　79　　(二)石蜡切片处理剂和PCR引物：采用的Texpat试盒和引物RPOT(F)(简称P1)和RPUT(R)(简称P2)均由日本国立感染病研究所多摩麻风中心松冈赠送。(三)dNTPs及Taq酶：购于上海复旦大学科技开发公司和遗传研究所。试剂盒全称为：FDDK－I DNA Amplication Kit I。二、方法(一)石蜡包埋活检组织中麻风菌模板DNA的释放与纯化：采用我们变动的松冈方法。将蜡块内包埋组织切成5μm厚切片，取5片置于1.5m LE ppendorf管中