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氧化损伤对3T3-L1 脂肪细胞内质网应激相关分子及 脂联素、MCP-1 、PAI-1 表达的影响 摘要 目的：氧化损伤及其自由基引起的脂肪细胞功能障碍是胰岛素抵抗发生 发展的重要病理生理基础，本实验以3T3-L1脂肪细胞为研究对象，观察氧化 物质第三丁基过氧化氢(t-BHP)对3T3-L1脂肪细胞中内质网应激相关分子 (BIP、p-IRE1a 、p-JNK)及脂肪细胞因子(脂联素、MCP-1 、PAI-1)表达的影响， 初步探讨氧化损伤引发脂肪细胞功能障碍的可能作用机制。 方法：体外培养3T3-L1 前脂肪细胞，将其诱导分化为成熟的脂肪细胞， 以 MTT 比色法检测不同浓度t-BHP 作用10min 后3T3-L1 脂肪细胞的存活情 况。以t-BHP （500µmol/L ，10min）作用于3T3-L1 脂肪细胞后换用无血清培 养液继续培养，利用Western Blot 检测在不同时间点(0、15、30、60、120min) 中内质网应激相关分子（BIP 、p-IRE1a 、p-JNK ）的表达；利用荧光定量PCR 检测不同时间点（2 、4 、8、12、24h ）中脂肪细胞因子（脂联素、MCP-1 、 PAI-1 ）的表达。 结果：(1) t-BHP （500µmol/L ，10min）可使3T3-L1 脂肪细胞内质网应 激相关分子BIP 、p-IRE1a 、p-JNK 表达均有增加，15min 时BIP 、p-IRE1a 即 活化，JNK 迟于前两者在30min 时磷酸化水平最高。(2)t-BHP 可剂量依赖性 的降低脂联素而增加MCP-1 、PAI-1mRNA 的表达，当t-BHP 浓度为100µmol/L 时，与对照组比较，脂联素下降88 % （P0.05 ），而MCP-1 、PAI-1 分别增加 1.27 倍和 1.33 倍，当t-BHP 浓度增为500µmol/L 时，脂联素下降到对照组 的43% （P0.01 ）而MCP-1 、PAI-1 分别增为对照组的2.85 倍（P0.01 ）和 3.05 倍（P0.01 ）。(3)500µmol/L 的t-BHP 对脂联素、MCP-1 、PAI-1 的调节 具有时间相关性，脂联素表达量在 8h 时降为基础的 53%，24h 时仅为 14% （P0.01 ），相反，MCP-1 、PAI-1 在 4h 时表达量最大分别为对照组的 6.83 倍(P0.01)和5.39 倍(P0.01) 。 结论：氧化损伤可能通过激活内质网应激相关分子（BIP 、p-IRE1a 、 p-JNK ）的表达、抑制脂联素的表达、促进脂肪细胞因子（MCP-1 、PAI-1 ） 4 的表达从而介导脂肪细胞功能障碍。 关键字：t-BHP 3T3-L1 脂肪细胞 脂联素 MCP-1 PAI-1 内质网应激 5 Effect of Oxidative Damage on the Expression of Endoplasmic Reticulum Stress-Related Protein and Adiponectin ,MCP-1,PAI-1 in 3T3-L1 Adipocytes ABSTRACT AIMS ：Oxidative damage and ROS induced adipocyte dysfunction,which play a significant role in the pathogenesis of insulin resistance. so we observed the effects of the oxidant t-BHP on the expression of endoplasmic reticulum stress- related protein (BIP,p-IRE1a,p-JNK) and adipokines(adiponectin ,MCP-1 ,PAI