靶向Livin的micro+RNA干扰对人卵巢癌耐药细胞SKOV3%2fCDDP体外顺铂化疗敏感性的影响.pdfVIP

中文摘要 iV i 靶向L n的mi 体外顺铂化疗的敏感性的影响 摘 要 乳头状腺癌顺铂耐药细胞SKOV3／CDDP对顺铂耐药性的体外变化。探讨 寻找卵巢癌治疗新方法提供理论依据。 方法： 1体外复苏、培养人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞SKOV3及耐药细胞 SKOV3／CDDP，并连续传代，于倒置显微镜下观察细胞形态。 2四甲基偶氮唑蓝(MTT)EL色法检测顺铂对人卵巢浆液性乳头状腺癌 SKOV3／CDDP的耐药指数。 该载体表达绿色荧光。用脂质体转染法转染人卵巢浆液性乳头状腺癌耐药 算转染效率。 胞增殖情况。应用流式细胞术检测转染前后SKOV3／CDDP细胞在浓度为 lug／ml顺铂作用24h后凋亡率的变化。 结果： =22．96／6．87=3．29，此耐药指数介于3和4之间，可进行耐药试验。 SKoV3／CDDP细胞24小时后，空白对照组细胞生长密集，光泽度好， 中文摘要 转染组及阴性转染组可见细胞密度略小于空白对照组，细胞光泽度下降， 荧光显微镜下见部分贴壁细胞呈绿色荧光。转染后48小时，空白对照组 细胞传代良好，转染组及阴性转染组细胞贴壁率下降，荧光显微镜下可见 呈现绿色荧光的贴壁细胞数增多，约占细胞总数70％．80％，证明转染成 功。转染72小时后，荧光显微镜下观察转染组及阴性转染组，可见呈现 绿色荧光的细胞数开始减少，120小时后荧光显微镜下只见到零星呈绿色 荧光的细胞。说明本实验利用脂质体转染法成功将设计合成靶向Livin基 因的microRNA序列转染了人卵巢浆液性乳头状腺癌耐药细胞 SKOV3／CDDP，但由于脂质体转染法自身具有的缺点，使得转染持续时 脂质体转染法转染人卵巢浆液性乳头状腺癌耐药细胞SKOV3／CDDP，在 72小时内是有效的，因此后续试验均在转染后72小时内完成。(见Fi94．7) 1．04±0．200，均低于阴性转染组及空白对照组吸光度，且有统计学意义 白对照组吸光度，且有统计学意义(PO．05)。在顺铂浓度为lOug／ml时， O．56±0．074，均低于阴性转染组及空白对照组吸光度，且有统计学意义 (P0．05)。说明在不同顺铂作用浓度及作用时间下，转染组细胞增殖抑制 率均明显增加，且与阴性转染组及空白对照组吸光度比较，差异有统计学 意义(PO．05)。(阴性转染组及空白对照组间吸光度无明显统计学差异)。 (见Table2-4) 4流式细胞术检测结果：浓度为lug／ml顺铂作用于细胞24h后，转 染组细胞凋亡率为24±3．296％，阴性转染组及空白对照组凋亡率分别为 率比较，差异具有统计学意义(P0．05)。(阴性转染组及空白对照组间吸光 度无明显统计学差异)。(见Table5) 结论： 体外培养试验中，microRNA干扰技术能够沉默卵巢浆液性乳头状腺 中文摘要 可能是逆转卵巢癌耐药的一种有效途径。 本实验只是初步探讨，应进一步进行体内试验研究，以使结论更具有 说服力。 英文摘要 TheEffects0fLivin microRNAonhunman targeted ● ● 1 ● ● l_● ●· OVarIanCarClnoma cellinVltro nrU擘reSlStanCe ABSTRACT ective：Transfectedhunmanovariancarcinoma cells obi drug-resistance withmicroRNA thee