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复方三黄液对60株骨科分离金黄色葡萄球菌体外抑菌效果研究
郭庆昕1 陈长贤2 陈晋兰3 钟黎鹃4 饶华春 1 周晓兰2
(福建中医药大学附属泉州市正骨医院1检验科,2脊柱科,3制剂室,4小儿骨科 福建泉州 362000)
【摘要】目的 了解复方三黄液对金黄色葡萄球菌的体外抑菌,为临床应用提供实验室依据。方法 采用肉汤稀释法,以复方三黄液为抑菌药,观察其对骨科感染分离出的60株金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果 42株MSSA中32株MIC为7.8 ug/ml, 10株MIC为15.6 ug/ml; 18株MRSA中14株MIC为7.8 ug/ml,4株MIC为15.6 ug/ml。MRSA组均值为9.6 ug/ml,MSSA均值为9.5 ug/ml。 结论 复方三黄液对金黄色葡萄球菌体外抑菌效果明显,并能避免耐药菌的产生。
【关健词】 三黄液 金黄色葡萄球菌 体外抑菌效果
泉州市正骨医院传承了南少林 “医武结合”的文化理念,先辈们在长期的医疗实践中研制出许多疗效显著的自制药,其中骨髓炎外用液(复方三黄液)是一剂有效的抗感染中药制剂。本试验采用肉汤稀释法,以复方三黄液为抑菌药,观察其对骨科感染分离出的60株金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果,为该药的临床应用提供实验室依据。
1 材料与方法
实验菌株
60株实验用金黄色葡萄球菌,来自于2011年1月至2012年7月我院门诊和住院的收治的骨科感染患者,采集伤口分泌物或脓液接种血平板、麦康凯平板,分离出的细菌按照第三版《全国临床检验操作规程》进行鉴定。采用K-B法进行药敏试验,其中分离菌头孢西丁抑菌圈≤21mm判定为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),头孢西丁≥22mm判定为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)[1]。金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC25923购自杭州天和微生物试剂有限公司。
实验药液
取黄连黄柏105~106cf u/ml的菌液0.05毫升。35℃培养箱中培养18-24小时后观察结果,阳性对照管第11管有细菌生长,阴性对照第12管无细菌生长,实验方为有效。以能抑制细菌生长的药物最低浓度作为该药对该菌的最小抑菌浓度(MIC)。在MIC实验基础上从无细菌生长的各管取材分别涂布于相应的琼脂平板培养基上,于35℃的恒温培养箱培养18-24小时,观察结果。琼脂平板上无细菌生长而含生药量最少的一管,即为该种药物对该菌株的最小杀菌浓度(MBC)。
1.4 质量控制
每批实验同时检测金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC25923的抑菌效果,以第6管相当15.6ug/ml生药有明显抑菌本批实验方有效。
结果
2.1 60株引起骨科感染的金黄色葡萄球菌中42株为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),18株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),两组测试菌对14种抗生素的敏感率见表1。其中18株MRSA对利奈唑胺、万古霉素敏度率100%,对β-内酰胺类、庆大霉素、红霉素、克林霉素等抗生素敏感率低或无效。
表1 MRSA和MSSA对14种抗生素的敏感率统计
抗生素 MRSA(n=18) MSSA(n=42) 敏感数(株) 敏感率(%) 敏感数(株) 敏感率(%) 青霉素 0 0.00 5 11.90 苯唑西林 0 0.00 42 100.00 头孢唑啉 0 0.00 39 92.86 头孢曲松 0 0.00 38 90.48 红霉素 0 0.00 12 28.57 克林霉素 0 0.00 16 38.10 氯霉素 0 0.00 36 85.71 利奈唑胺 18 100.00 42 100.00 庆大霉素 0 0.00 35 83.33 左氧氟沙星 2 11.11 32 76.19 环丙沙星 2 11.11 31 73.81 万古霉素 18 100.00 42 100.00 多西霉素 5 27.78 38 90.48 利福平 5 27.78 39 92.86 复方新诺明 6 33.33 35 83.33 2.2 复方三黄液对60株金黄色葡萄球菌抑菌效果明显,其中42株MSSA中32株MIC为7.8 ug/ml, 10株MIC为15.6 ug/ml; 18株MRSA中14株MIC为7.8 ug/ml,4株MIC为15.6 ug/ml。MRSA组均值为9.6 ug/ml,MSSA均值为9.5 ug/ml,两组数据经t检验,P值为0.89,差异无统计学意义。复方三黄液对60株金黄色葡萄球菌无直接杀菌作用。
表2 复方三黄液对MRSA与MSSA最低抑菌浓度
MSSA MRSA 株数 32 10 14 4 MIC(ug/ml) 7.8
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