大肠杆菌植酸酶原核表达及酶学性质.pdfVIP

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2017-08-30 发布于安徽
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大肠杆菌植酸酶原核表达及酶学性质.pdf

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2009 15 3 ): 371~375 2009-06-25 应用与环境生物学报， ( Chin J Appl Environ Biol=ISSN 1006-687X DOI: 10.3724/SP.J.1145.2009.00371 大肠杆菌植酸酶的原核表达及酶学性质* 1, 2 3 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2** 黄敏徐辉曹瑜朱俊张飞伟尤芳芳乔代蓉曹毅 1 ( 四川大学生命科学学院成都 610065） 2 ( 四川大学微生物与代谢工程四川省重点实验室成都 610065) 3 ( 四川阳光博睿生物技术有限公司成都 610016) 摘要将大肠杆菌植酸酶 appA基因重组于表达载体pET32a 中，导入大肠杆菌Origami (DE3)构建工程菌 Origami (DE3)-pET32a-appA. 对表达的appA重组植酸酶经Ni柱亲和纯化、SDS分析表明，纯化后条带单一，酶的纯度较 6 高. 对其酶学性质的研究表明，该酶反应的比活力为3.36 ×10 U/mg ；最适pH为4.5 ；最适温度为60 ℃；在80 ℃和85 ℃的 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ + 耐干热能力超过耐湿热能力；在37 ℃下，Mg ﹑Ca ﹑Mn 对酶活性有促进作用，Co ﹑Cu ﹑K 对酶活性有不同程度的抑制作用，而Fe3+ 和Zn2+对酶活性有强烈的抑制作用；此外，该酶还具有非常好的抗胃蛋白酶水解的能力和部分抗胰蛋白酶水解的能力. 图8 表 1 参21 关键词 appA植酸酶；原核表达；亲和纯化；酶学性质 CLC Q556.9 Characteristics of Phytase from Escherichia coli * 1, 2 3 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 HUANG Min , XU Hui , CAO Yu , ZHU Jun , ZHANG Feiwei , YOU Fangfang