点青霉MH1发酵热稳定性外切菊粉酶培养基优化及酶学性质的研究.pdfVIP

点青霉MH1发酵热稳定性外切菊粉酶培养基优化及酶学性质的研究.pdf

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第 卷 第 期 中 国 食 品 学 报 6 3 Vol.6 No.3 年 月 JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnology Jun.2006 2006 6 点青霉MH1发酵热稳定性外切菊粉酶的培养基优化及 酶学性质研究 何国庆 MokhtarA.M.陈启和 汤兴俊 (浙江大学食品科学与营养系 杭州 ) 310029 摘要 为了分离出热稳定性胞外菊粉酶产生菌,并使菊粉酶的生产、产酶最大化以及分析其酶学性质,进行了 本实验。实验结果表明:株产外切 果糖转化酶的点青霉从菊芋生长的环境中被分离,并经过诱变命名为 1 β-D- 点青霉( ) 。采用半部分因子设计和中心组合设计对影响菊粉酶生产的培养基组成中主 PenicilliumnotatumMH1 要因子进行了优化,得到一最优培养基组成( ):菊芋粉 ,牛肉膏 ,酵母膏 ,豆饼粉 , , g/L 24 5 1 1KHPO 3 2 4 · ,初始 。优化试验结果显示:在 、 摇床转速下培养 ,采用优化的培养基 MgSO 7HO0.2 pH3.5 34℃200r/min 48h 4 2 发酵生产得到的最大菊粉酶活力为 。对酶的部分性质进行了研究,其最适 为 ,酶在 具 32.46U/mL pH 4.2 pH3~7 有反应活性,最适作用温度为55℃。粗酶液经过硫酸铵分级盐析,其适宜的盐析饱和度为20%~58%,盐析后酶 液通过 纤维素 和 柱层析,纯化后得到的酶采用 检测分析,结果显示 DEAE- DE SephadexG-100 SDS 52 该酶的分子质量为( ) 。 108±1KDa 关键词 外切菊粉酶 菊芋 点青霉MH1 优化 纯化 文章编号 ( ) 1009-7848200603-0019-07 菊粉是由 呋喃果糖以 , 糖苷键连接 在微生物代谢产物的研究中,微生物培养基 D- β-21- 的多聚果糖。其还原端接 1个葡萄糖基,呈直链结 的优化工作起着举足轻重的作用。在实验室研究 构[1] 中最常用的优化策略是单次因子法 ,富含于菊芋等多种菊科植物中。菊芋块茎主 ( one-variable- 要成分是菊粉,其含量占干重的

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