Lactococcus lactis谷氨酸脱羧酶的分离纯化及部分酶学性质.pdfVIP

下载本文档

7
0
约1.44万字
约 6页
2017-08-30 发布于安徽
举报
版权申诉

Lactococcus lactis谷氨酸脱羧酶的分离纯化及部分酶学性质.pdf

1、本文档共6页，可阅读全部内容。
2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

维普资讯第 23卷第 3期无锡轻工大学学报 Vo1．23 No．3 2004年 5月 JournalofW UXiUniversityofLightIndustry M ay 2004 文章编号：1009—038X(2004)03—0079—06 Lactococcuslactis谷氨酸脱羧酶的分离纯化及部分酶学性质许建军，江波 ● 许时婴 (江南大学食品学院，江苏无锡 214036) 摘要：采用溶茵酶处理、超声破碎、硫酸铵分级、3次DEAE—SepharoseCL一6B层析、SephacrylS一 200凝胶过滤等手段，从乳酸茵细胞中分离纯化得到谷氨酸脱羧酶 (GAD；EC4．1．1．15)．纯化酶的比活力为 14．4U／mg，纯化倍数 31，回收率 3．8 ，SDS—PAGE得到亚基的相对分子质量为 65000．L-谷氨酸是测试的18种氨基酸中的惟一作用底物，表明乳酸茵GAD具有高度的底物专一性．酶在 pH值 3．6～5．4时具有活性，pH值4．7时活性最高，pH 值 6．0以上时没有活力．耐热性实验表明，PH值 4．7务件下处理 5h后，6OC时该酶仍能保持 8O 以上的活性，8O℃以上迅速失活，由Lineweaver—Burk作图得到的GAD的K 值为 1．9mmol／L．关键词：Lactococcuslactis；谷氨酸脱羧酶(GAD)；纯化；7一氨基丁酸(GABA) 中图分类号：Q55 文献标识码：A Purification andPartiaICharacterizati0n of GlutamateDecarb0xyIasefrom Lactococcuslactis XU Jian—jun， JIANGBo ， XU Shi—ying (SchoolofFoodScienceandTechnology，SouthernYangtzeUniversity．W uxi214036．China) Abstract：GlutamateDecarboxylase (GAD；EC4．1．1．15)waspurified from Lactococcuslactis SYFS1．009 with 1ysozymic treatment， sonication， ammonium sulfate fractionation，DEAE- SepharoseCL一6B chromatographyandSephacrylS一200 gelfiltration．Thespecificactivityofthe purifiedenzyme，concentratedabout31-fold，is14．4U／mLwithayieldof3．8 ．Singleband obtainedbySDS—PAGE showedsubunitMw is65000．L-glutamateistheuniquedecarboxy1ation substrateamong 18amino acidstested，suggesting theenzymebehighly specific．Theenzyme showsisactivityatacidicpH (3，6～5．4)rangeandtheoptimalpH is4，7，Noactivitywasdetected abovepH6，0．Theenzymekeepsmorethan80 ofitsactivitybelow 60 ℃ during5-hourstorage andwasinactivatedrapidlyat80 ℃．TheapparentK oftheenzymeobtainedfrom Lineweave