小鼠肝星状细胞对肝脏干细胞增殖及代谢的影响.pdfVIP

·988· ·实验研究· 小鼠肝星状细胞对肝脏干细胞增殖及 代谢的影响 常文举 宋陆军 徐兴远 王洪山 高晓东 牛伟新秦新裕 【摘要】 目的应用小鼠肝星状细胞(HSC)与小鼠成体肝脏干细胞(AHPC)体外间接共培养 模型，观察HSC旁分泌途径对AHPC增殖及代谢功能的影响。方法分别建立HSC及AHPC细胞 分离及培养模型。进一步选择Transwell6孔板，建立小鼠HSC与AHPC间接共培养模型。在共培 养24h和96 h后，计算AHPC克隆数及克隆形成率；共培养14d后，行5一溴脱氧尿嘧啶核苷 (5-BrdU)增殖实验，计算AHPC细胞克隆内BrdU阳性的细胞数，评估细胞增殖能力。同时，收集细 胞上清液行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞代谢产物以评估细胞的代谢能力。通过以上方法 比较HSC组和空白对照组中AHPC在克隆形成率、细胞增殖及代谢功能上的差异。结果HSC组 AHPC的克隆形成率为(26．88±3．31)％，对照组为(20．1l±2．34)％(P0．05)。BrdU增殖实验提 示，对照组内BrdU／白蛋白双阳性细胞为(69．50±18．81)／高倍视野，较HSC组增