养殖鱼类生殖内分泌调控相关功能基因的研究和应用.pdfVIP

第17卷第2期 中国水产科学 V01．17 No．2 2010年 3月 JournalofFisherySciencesofChina March 2010 · 特约综述 · 养殖鱼类生殖 内：分泌调控相关功能基因的研究和应用 张勇，李水生，刘-Z-，刘晓春，林浩然 (中山大学 有害生物控制与资源利用国家重点实验室；水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物繁殖重点实验室，广东 广 州 510275) 摘要：新型的神经 内分泌因子 kisspeptin与GnIH(gonadotropin—inhibitoryhormone)对哺乳动物的生殖轴起着直接而相反的 调控作用，kisspeptin刺激脑垂体促性腺激素 (GtH，gonadotropin)的合成与释放 ，而GnlH抑制GtH的合成与释放。然而，在 鱼类中，相关研究甚少。本研究室利用比较基因组学技术，通过同线性分析结合分子生物学手段 ，在斑马鱼(Daniorerio)、 金鱼 (Carassiusauratua)中克隆得到了kisspeptin(kissl、 s2)与GnIH以及它们相关受体的基因cDNA序列。氨基酸序列 同源比对结果显示：在脊椎动物中，kisspeptin的核心肽相对保守，而GnIH的核心肽在不同物种中则有较大的差异。比较 基因组分析显示kisspeptin与 GnlH基因在鱼类 、两栖类、鸟类和哺乳类都维持着保守的同线性结构；并且，同线性的结果 表明，鱼类 』与 2基因来源于早期的基因组复制 ，在漫长的进化过程中，哺乳类丢失了 2基因。通过配体受体结 合实验，证明2种kisspeptins均能激活其相关受体 GPR54(GPR54a、GPR54b)，启动下游通路，但却存在一定的配体一受体 选择性差异。金鱼 、斑马鱼组织表达模式研究显示：kisspeptins与GnlH以及它们相关受体在生殖相关组织或区域 (下丘脑、 垂体、性腺)均有丰富的表达，提示 kisspeptins与 GnIH可能参与鱼类的生殖调控。通过化学合成金鱼kisspeptins与GnIH 的核心肽，在体注射成熟的雌性金鱼，发现 J能显著刺激金鱼LH的分泌，并且能诱导金鱼排卵，而 如s2不能；在高剂 量的状况下，GnIH亦能有效抑制金鱼 LH的分泌。然而 ，在离体实验中，2种kisspeptin与GnIH对金鱼垂体细胞LH的分 泌均没有显著的影响，提示 kisspeptins与GnIH对金鱼的LH调控可能发生于下丘脑水平。以上结果表明：与哺乳动物相 类似，在鱼类生殖轴中也存在kisspeptins与GnIH的正负调控系统。本文侧重对这项研究以及相关的研究成果进行归纳 与分析，旨为深入探讨鱼类生殖内分泌调控相关功能基因提供参考。[中国水产科学，2010，17(2)：363—368] 关键词 ：kisspeptin；GnIH；GtH；生殖调控 中图分类号：S9 文献标识码：A 文章编号 ：1005—8737一(2010)02—0363—07 鱼类是人类所需动物蛋 白的重要来源。中国是 制成功国内外首创的新型鱼类催产剂，取得显著的 世界第一的渔业大国和水 养殖大国，其中，水产养 推广应用成效，解决了养殖鱼类人工繁殖和苗种来 殖产量占世界总产量70％左右。在水产养殖品种中， 源的问题。进入 21世纪后，开发利用水产养殖动物 鱼类是继藻类、贝类和虾类之后的第 四个发展浪潮。 基因资源成为建设现代养殖业的重要研究方向。本 目前，中国的养殖鱼类产量已占水产养殖产量的56％ 实验室系统进行鱼类生殖调控相关激素与神经内分 以上。鱼类养殖是中国水产业今后发展的主攻方向。 泌因子及其受体基因的克隆和重组表达，取得一些 养殖鱼类的生殖生长和苗种规模化繁育是鱼类养殖 新的进展，为研制新一代鱼类催产剂奠定基础。本 业持续健康发展的必要前提和关键技术基础之一。 文侧重对这方面的研究进行归纳与分析，旨在为深 20世纪80～90年代 ，本实验室系统进行鱼类