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分子分型在医院感染控制中的作用(the Role of Molecular Typing in Nosocomial Infection Control) 分子分型(分子流行病学研究) 从核酸分子水平上分析医院感染的发生、发展规律及机理,更加准确有效地进行医院感染管理控制,已成为当前国际医院感染管理研究中的重要方向。 微生物室在医院感染中的作用 accurately identifying nosocomial pathogens detecting unexpected antimicrobial-drug resistance epidemiologic typing PFGE(脉冲场凝胶电泳) RAPD(随机扩增DNA多态性) REA(限制性酶切) ribotyping (核糖体分型) 消化、释放出DNA PFGE原理 酶切 Tenover FC.et al.J Clin Microbiol,1995;33(9):2233~2239 PFGE原理 原理: PFGE原理 时间消耗 从分离菌株到出结果平均 2.5 天 标本准备、细胞裂解--第一天 酶切--第二天 染色、拍照--第三天 PFGE结果判读 目测法: 按美国疾病控制和预防中心(CDC)Tenover等人推荐的方法判读。 图谱完全相同的定为一个型,彼此之间相差一个带的定为同一型的不同亚型,相差2-3个带的认为亲缘关系密切,相差4-6个带的认为可能相关,条带相差7个以上的认为无亲缘关系。并随机地选择不同的字母如A、B、C、D等的字母顺序分型。 聚类分析 计算机输入SPSS,做树状图 PFGE同源性分析 PFGE特点: DNA原位提取法,减少了断裂 利用细菌全基因组信息 细菌分型金标准 2、RAPD(随机扩增DNA多态性) 1990年 Williams:RAPD Welsh:AP-PCR 本质上相同 ESHWAR MAHENTHIRALINGAM.et al.J Clin Microbiol,1996;34(5):1129~1135 Northwestern Memorial Hospital, Chicago 700-bed, university-affiliated medical center 出院:39,000/年 急诊:56,000例/年 门诊量:260,000/年 分型确认后及干预效果 指标 the total number of nosocomial infections per 1,000 patient days每千住院日医院感染数 the number of patients with nosocomial infections per 100 patient discharges 每100出院病人医院感染病人数 (percentage of patients with nosocomial infection) (医院感染病人百分比) 感染控制工作小组成员: We formed a permanent, integrated infection control and prevention program that fully incorporates 资料收集方法(Methods for data collection): review of microbiology reports review of patients medical records, direct observation of medical and nursing practice, active surveillance of rectal cultures of patients in nursing units for high-risk patients, evaluation of suspected nosocomial infections reported by health-care providers. Two interventions: a molecular typing laboratory a weekly planning meeting infection control diagnostic medical microbiology (molecular epidemiology) Pharmacy and infectious diseases 周会内容: 医院感染动向(短期、长期) 感染控制专职人员和微生物实验室的工作 决定需要做的调整 需分型的病原体与主管讨论决定 需基因分型的微生物: routinely genomically typed:VRE Period
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