营养因素与培养条件对Pilidium concavum病菌菌丝生长及产孢量的影响.pdfVIP

· 植物保护 · 北方 园艺2010(4)：164～167 营养因素与培养条件对PilidiumCOTICaZ)RTII病菌 菌丝生长及产孢量的影响 段 亚 冰，余 真 真，陈 艳 利，康 业 斌 (河南科技大学 林学院，河南 洛阳 471003) 摘 要：为了探 讨不同培养基、碳 氮源、温度、pH值、光照对 Pilidiumconcavurn(Desm．) Hohn．茵丝生长及分生孢子产量的影响。试验采用十字交叉法测量茵丝生长量，用血球计数板法 测量产孢量。结果表明：该菌在PDA上生长最适，在 PYA上产孢最多。在最适培养基上培养， 菌丝生长的适宜温度为 15~30。C，最适温度为 25℃，产孢最适温度为 3O。C；在 pH值 6～11范围 内该茵均能生长和产孢，茵丝生长的最适 pH值为 6，pH值为 1】产孢最多；光照对菌丝生长、产 孢无显著影响；在供试的碳氮源 中，菌丝生长及产孢 以葡萄糖、酵母膏最适。 关键词：PilidiumCOTICaUu~；营养因素；培养条件；分生孢子 中图分类号：Q949．321 文献标识码：A 文章编号 ：1001--0009(2010)04—0l64一O4 Pilidium c0∞ z(Desmaz．)Hohn．f共 无 性 型 1．2 试验方法 Hainesialythri(Desmaz．)Hohn．；有性 型 Discohainesia 1．2．1 不同培养基对病原菌菌丝生长及产孢量影响的 oertotherae(CookeEllis)Nannf． 是 国内报道为害牡 测定 将直径 41TlIn的菌饼接种于PDA，PSA，Czapek， 丹的又一种病原真菌，目前在河南洛阳、郑州等地均有 OMA，CMA，PYA，PCA，YA，wA，基础培养基L7(其配 发生 ]。病菌一般在 7月份开始侵染牡丹叶片 ，初为长 方为 K2P 1g，KC10．5g，MgSO4·7H2O0．5g，FeS04 圆形红褐色小斑，略凹陷，中央灰 白色，后期病斑逐渐扩 0．01g，琼脂 17g，蒸馏水 1000mL，碳源 3Og，氮源2g) 大，黄褐色 ，边缘淡褐色，具有明显同心轮纹，中部有呈 等平板培养基上 ，于 25℃下培养 ，每个处理 3皿 ，重复 3 轮状排列的桔红色粘质团小点 ，8～9月份多雨潮湿时田 次，7d后用十字交叉法测量菌落直径，观察菌落生长状 间发病率较高，危害严重。为了掌握其发生规律，试验 况，8d后用血球计数法_8测定分生孢子产生量 (下同)。 对其部分生物学特性进行了研究 ，为进一步控制该病的 1．2．2 不同碳源对病原菌菌丝生长及产孢量影响的测 发生危害提供理论依据。 定 在基础培养基中，以酵母膏为氮源，分别测定葡萄 1 材料与方法 糖、蔗糖 、淀粉、乳糖、麦芽糖对菌丝生长和产孢的影响， 1．1 试验材料 以无碳源培养基 WA 为CK，每个处理 3皿，重复 3次， 标样采于河南省洛阳市国家牡丹园，进行常规组织 7d后用血球计数测量菌落直径，8d后计测产孢量。 分离，再经过单孢分离后获得病原菌纯培养 ¨5]。采用 1．2．3 不同氮源对病原菌菌丝生长及产孢量影响的测 法l6并作适当改进提取基因组 DNA，进行 PCR 定 在基础培养基 中，以葡 萄糖为碳源，分别测定 扩增，PCR产物经纯化后克隆测序(由上海生工公司完 KNO3、蛋白胨、酵母膏、牛肉膏对菌丝生长和产孢 的影 成)。对测得的菌株rDNAITS序列运用 GenBank中的 响，以无氮源培养基 WA 为 CK，每个处理 3皿，重复3 BLAST工具在DNA序列数据库中搜索同源DNA序列 次