电化学法与研究硫酸多粘菌素B与磷脂相互作用.pdfVIP

摘要 摘要 生物膜结构是细胞结构的基本形式，生物膜参与生物学中许多重要的过程。 当药物进入人体内，生物膜是药物进入细胞内的一道屏障，因此研究药物 和生物膜的相互作用有利于了解药物在体内的吸收、分布以及生物利用度 等情况。由于生物膜结构、组成以及膜内外的环境都非常复杂，13前的许多研 究还不能在膜原位进行，为了便于对生物膜的各种物理化学特性进行深入研 究，实验室往往制备由一种或几种脂质组成的各种模拟生物膜结构并对其 进行各项研究。本文主要采用电化学循环伏安法、电化学交流阻抗谱以及 子膜体系进行了研究，并以此来考察和探究不同的脂质成分对药物和生物膜相 互作用的影响，这对于了解药物的作用靶点及新药的设计、优化等均具有重要 的意义。多粘菌素B是‘‘种常见的由多粘芽胞杆菌产生的··组抗革兰氏阴 性杆菌的多肽类抗生素。多粘菌素B主要作用于细胞膜，所以在多粘菌素 B发挥药效时对正常细胞的细胞膜也可能产生影响。文献对其与革兰氏阴 性杆菌外膜的脂多糖的相互作用报道居多，而对其与细胞膜作用的研究并 不常见。冈此本文将以其为药物模型来研究药物与模拟生物膜的相互作用 及其可能对人体产生的副作用。本文研究的主要内容如。卜．： 1．利用自组装技术在金电极表而制备了金支撑的混合双层膜 对硫酸多粘菌素B与磷脂酰胆碱的相互作用进行了研究。结果表明，硫酸多粘 菌素B能够破坏磷脂分子的有序排列，诱发混合双层膜产生孔洞或缺陷，导致 混合双层膜的膜电阻降低，从而增加了探针分子Fe(CN)63-陴与电极问的电子传 递。实验发现这种相互作用的强度受到硫酸多粘菌素B溶液的浓度、pH值及其 相互作用的时问和胆固醇的影响。通过自修复实验的考察，我们发现，被硫酸 多粘菌素B破坏的双层膜在一定程度内膜上的磷脂分子可以在KCl支持液中重 新白纽装，且这种自我修复的程度与修复时问和与之相互作用的硫酸多粘菌素B 的浓度有关。 2．利用自组装技术在金电极表面制备了金支撑的脂质双层膜(DPPTE, 摘要 术研究了硫酸多粘菌素B与脂质双层膜(DPPTEDMPS)的相互作用，并利用 果表明，硫酸多粘菌素B能够破坏磷脂分子的有序排列，诱发脂质双层膜产生 孔洞或缺陷，导致脂质双层膜的膜电5儿降低，从而增加了探针分子Fe(CN)6¨ 与电极问的电子传递。实验发现这种相互作用的强度受到硫酸多粘菌素B溶液 的浓度、作用的时间以及膜中胆同醇含量的影响。通过自修复实验的考察，我 们发现，被硫酸多粘菌素B破坏的双层膜电极在一定程度内膜的磷脂分子在室 温条件下可以重新自纽装，且这种自我修复的程度与修复时间和与之相互作用 的硫酸多粘菌素B的浓度有关。 LB实验结果表明，硫酸多粘菌素B的亲脂链可以嵌入到DMPS磷脂 膜烃基链所形成的疏水区域中，且正电性的硫酸多粘菌素B可与负电性的磷脂 酰丝氨酸南静电作用而结合在磷脂膜上，从而诱导DMPs膜中分子排列的变化 并引起分子膜压的升高。 3．利用自组装技术在金电极上制备了金支撑的不同的脂质双层膜为生物膜 模型，采用循环伏安法研究了不同的脂质成分对硫酸多粘菌素B和生物膜相 互作用的影响。实验结果表明：①实验所用到的磷脂均可与硫酸多粘菌素B 发生相互作用，使磷脂双分子层结构遭到破坏，并产生孔洞，且所有磷脂与硫 酸多粘菌素B的相互作用强度均随硫酸多粘菌素B溶液浓度的增大而增强：② 磷脂头基对硫酸多粘菌素B与脂质双层膜相互作用影响的研究表明：在弱酸性 条件下当硫酸多粘菌素B的浓度低于Z10-3mol／L时，其对DPFrrE～DMPE、 脂酰烃链长度对硫酸多粘菌素B与脂质双层膜相互作用影响的研究表明：当磷 脂头基及其烃链结构相同时，含有较短烃链的磷脂更易于与硫酸多粘菌素B发 生相互作用；④磷脂酰烃链不饱和性对硫酸多粘菌素B与脂质双层膜相互作用 影响的研究表明：当磷脂的头基及其疏水烃链长度相同时，疏水烃链含有刁i饱 和键的磷脂更易于与硫酸多粘菌素B发生棚互作用。 关键词：硫酸多粘菌素B硫醇磷脂循环伏安法交流阻抗谱LB Abstract Abstract thebasic ofthe basic This