人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549-GR的建立及小白菊内酯逆转耐药机制研究.pdfVIP

重庆医学 年 月第 卷第 期 ２０１２ １２ ４１ ３５ ３６８９ ·论 著 · 　　 人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系 ／ 的建立及 Ａ５４９ ＧＲ 小白菊内酯逆转耐药机制研  刘 英，姚开泰，肖广惠△ 　 （南方医科大学肿瘤研究所，广州 ） ５１０５１５ 摘 要：目的 建立人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系 ／ ，研究其耐药机制，探讨小白菊内酯（ ）逆转 ／ 耐药 Ａ５４９ ＧＲ ＰＡＲ Ａ５４９ ＧＲ 　　 　 　 的机制。方法 以吉非替尼为诱导剂，人肺腺癌细胞系 Ａ５４９为诱导对象，采用大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法，诱导 　 建立人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系 ／ 。采用细胞毒实验（ ）法测定细胞耐药指数，免疫印迹法（ ）检 Ａ５４９ ＧＲ ＭＴＴ Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎ ｇ 测细胞耐药相关蛋白表达水平，进一步通过 法检测 对 ／ 的逆转倍数， 双标法检测 的促 ＭＴＴ ＰＡＲ Ａ５４９ ＧＲ ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ ＰＡＲ 凋亡作用， 检测细胞凋亡相关蛋白表达水平。结果 所建立的人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系 ／ 耐药指 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎ Ａ５４９ ＧＲ ｇ 　 数为 。 ／ 细胞中 和 耐药相关蛋白表达水平较 升高。 结果显示 对耐药细胞 ／ １８．７ Ａ５４９ ＧＲ ＭＤＲ ＡＢＣＧ２ Ａ５４９ ＭＴＴ ＰＡＲ Ａ５４９ ＧＲ 的逆转倍数为 。 凋亡检测结果显示 能有效促进 ／ 细胞凋亡， 检测显示 ８．６６ ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ ＰＡＲ Ａ５４９ ＧＲ Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎ ＰＡＲ ｇ 能有效降低 、 两种抑制凋亡相关蛋白的表达。结论 成功建立了人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系 ／ ； 通 ｓｕｒｖｉｖｉｎＢｃｌ２