人脑胶质瘤多药耐药细胞株的构建及生物学特性鉴定.pdfVIP

人脑胶质瘤多药耐药细胞株的 构建及生物学特性鉴定 白义凤 廖红展 刘天助 郭洪波 目的体外构建胶质瘤耐 甲磺酸伊玛替尼多药耐药细胞株，并研究其生物学特性。 方法采用逐渐增加培养基中伊玛替尼药物浓度的方法诱导构建耐甲磺酸伊玛替尼的人脑胶质瘤 U251细胞株 (命名为U251AR);CCK8法检测U251AR、U251对多种化疗药物的IC50和耐药指数； QRT-PCR法检测耐药相关基因ABCC1、ABCB1、ABCB4、ABCG2mRNA的表达，流式细胞术检测 ABCG2蛋白的表达。 结果 体外培养12个月后建立了稳定耐药的细胞株U251AR,与亲代细 胞相比异形性不显著。U251和U251AR对化疗药物的IC50相比较差异均有统计学意义 （P＜0.05）， U251AR对甲磺酸伊玛替尼、阿霉素、顺铂的耐药指数分别为20.41、5.06、10.28，表现出多药耐药特 征。QRT-PCR检测结果显示耐药细胞株U251AR中ABCC1、ABCB1、ABCB4、ABCG2mRNA的表达 明显高于亲代U251细胞，流式细胞术检测结果显示U251AR中ABCG2蛋白的表达强于亲代 U251细胞，差异均有统计学意义(P＜0.05)。 结论成功建立多药耐药的胶质瘤细胞株U251AR， 其多药耐药与ABCC1、ABCB1、ABCB4、ABCG2mRNA及ABCG2蛋白的表达上调相关。 神经胶质瘤； 甲磺酸伊玛替尼；多药耐药性;细胞株 R730.264 A 1671-8925(2011)08-764-04 Establishmentofhumanglioblastomamultiformmultidrugresistantcelllineinvitroand identificationofitsbiologicalcharacteristics BAIYi-feng* LIAOHong-zhan LIUTian-zhu GUOHong-bo *DepartmentofOncology,ZhujiangHospital,SouthernMedicalUniversity,Guangzhou 510282,China Objective Toestablishtheimatinib (STI-571)-resistantsublineinvitroand investigateitsbiologicalcharacteristics. Methods Humanglioblastomamultiformdrug-resistantcell line(namedU251AR)wasestablishedinvitrobysuccessivelyincreasingtheconcentrationofimatinibin acellculturemedium. The50％ inhibitorydose(IC50) valuesandtheresistanceindexes([IC50 U251/STI-571]/[IC50U251])forotherchemotherapeuticagentswereevaluatedusingcellcountingkit-8 assays.ExpressionsofacquiredmultidrugresistanceP-glycoprotein(MDR1,ABCB1;MDR3,ABCB4), breastcancerresistanceprotein(BCRP,ABCG2)andmultidrugresistance-associatedprotein1(MRP1, ABCC1)weredetectedbyQRT-PCR.Flowcytometrywasemployedtodetecttheproteinexpressionof ABCG2. Results TheU251ARwasdevelopedafterculturefor12monthsandsimilarmorphologies ofU251andU251/STI-571cellsweredetermined.TheresistancecoefficientofU251ARcellstoimatinib was20.41timesmorethanthatoftheparentcells,andU251ARcellsshowedcross-resistancetomany anti-tumoragents(P＜0.05).Theresistan