液相色谱法同时测定水产品中孔雀石绿和结晶紫残留.pdfVIP

第34 卷 分析化学（FENXI HUAXUE ） 研究简报 第5 期 2006 年5 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 663 ～ 667 液相色谱法同时测定水产品中孔雀石绿和结晶紫残留 # 张志刚 施冰 陈鹭平 林立毅 周昱 （厦门出入境检验检疫局，厦门361012 ） 摘 要 用液相色谱-可见法同时测定水产品中孔雀石绿（MG ）、结晶紫（CV ）及其代谢物隐色孔雀石绿 （LMG ）和隐色结晶紫（LCV ）的残留量，并用液相色谱- 串联质谱法进行确证和定量。样品用乙腈提取，二氯甲 烷液液分配，MCX 阳离子固相萃取小柱净化，浓缩定容。以乙酸铵缓冲溶液和乙腈为流动相，经C18 柱分离 后， PbO2 柱后衍生；用二极管阵列检测器在618 nm 测定孔雀石绿和隐色孔雀石绿，在588 nm 测定结晶紫和隐 色结晶紫；并用串联质谱在电喷雾-多反应监测离子的模式下，进行质谱确证和定量；外标法定量，内标亮绿和 氘代隐色孔雀石绿校正回收率。液相色谱-可见法的检出限为 MG 0. 22 ，LMG 0. 28 ，CV 0. 22 ，LCV 0. 25 µg / kg ；液相色谱- 串联质谱法的检出限为MG 0. 014 ，LMG 0. 018 ，CV 0. 014 ，LCV 0. 0084 µg / kg 。在2 ～ 20 µg / kg 范围内，回收率为75% ～ 95% 。 隐色结晶紫 关键词 高效液相色谱，液相色谱- 串联质谱，孔雀石绿，隐色孔雀石绿，结晶紫， 1 引 言 孔雀石绿（malachite green ，MG ）和结晶紫（crystal violet ，CV ）同属于碱性三苯甲烷类染料，具有类似 的结构（见图1 ），在水产养殖过程中，常作为杀菌剂和抗寄生虫药，用于防治各种鱼病。该类物质在鱼 体内代谢为隐色孔雀石绿（ ［1］ LMG ）和隐色结晶紫（LCV ）（见图1 ），长期残留于生物体内 。由于三苯甲 烷具有致突变、致畸和致癌作用，欧美、中国和日本等宣布严禁在水产养殖中使用孔雀石绿和结晶紫，并 规定孔雀石绿（含隐色孔雀石绿）和结晶紫（含隐色结晶紫）不得检出。 图1 孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫、隐色结晶紫和亮绿的分子结构 Fig. 1 Chemical structure of malachite green （MG ），leuco malachite green （LMG ），crystal violet （CV ），leuco crystal violet（LCV ）and brilliant green（BG ） 国内外对水产品中孔雀石绿和结晶紫残留分析的报道主要集中在孔雀石绿和隐色孔雀石绿的测 定，有HPLC-VIS 、HPLC-MS 、HPLC-MS / MS 等方法［2 ～ 8 ］；关于结晶紫和隐色结晶紫测定的报道较少，仅有 ［2 ，6 ，7 ］ ［9 ］ HPLC-VIS 法 、HPLC-MS 法 ；同时测定孔雀石绿、结晶紫及其代谢产物残留的HPLC-MS / MS 方法 在国内外均未见报道。本研究采用液相色谱-柱后衍生-可见法同时测定MG 、LMG 、CV 、LCV 残留量，并 建立了串联质谱确证方法。实验表明，该方法的灵敏度和准确度较高，净化效果好，各项技术指标均符 合残留分析的要求，可以满足各国的检测要求。 2 实验部分 2 . 1 仪器与试剂