藤黄酸逆转人结肠癌细胞株SW480奥沙利铂耐药性的作用及机制研究.pdfVIP

· 2 7 3 · 中华普通外科学文献（电子版）2013 年 8 月第 7 卷第 4 期 Chin Arch Gen Surg（Electronic Edition)，August 2013，Vol.7，No.4 ·论著 · 藤黄酸逆转人结肠癌细胞株 SW480 奥沙利铂耐药性的作用及机制研究 杨平　曹杰　谭明华　张通　王成兴　孙政　张伟健　曾山崎 　　【摘要】　目的　探讨藤黄酸对多药耐药人结肠癌细胞株 SW480/L-OHP 的耐药逆转及其对 多药耐药基因 （MDR1）和 P- 糖蛋白（P-gp）表达的影响。方法　采用逐步增加药物浓度的方法 建立奥沙利铂耐药结肠癌细胞株 SW480/L-OHP。噻唑蓝（MTT）法测定 SW480/L-OHP 细胞株的 耐药指数和藤黄酸在无细胞毒浓度下对结肠癌细胞耐受奥沙利铂的逆转作用 ，流式细胞术检测细 胞凋亡、周期变化，RT-PCR 检测各组细胞 MDR1 mRNA 表达水平，Western blot 检测各组细胞 P-gp 蛋白的表达水平 。结果　藤黄酸对结肠癌 SW480 及 SW480/L-OHP 细胞增殖均具有抑制作用，且 呈量效关系。奥沙利铂与低毒剂量藤黄酸共同作用 SW480/L-OHP 细胞，其 IC50 显著降低（P 0.05）， 耐药逆转倍数为 3.72。与奥沙利铂单药组相比，加入低毒剂量藤黄酸后，细胞凋亡率明显增加， 差异有统计学意义 （P 0.05）。藤黄酸作用后 MDR1 mRNA 转录水平降低，同时下调了 P-gp 蛋 白表达。结论　藤黄酸部分逆转 SW480/L-OHP 细胞对奥沙利铂的耐药性，其机制与增加细胞内 奥沙利铂的蓄积，抑制 MDR1 基因的表达及降低 P-gp 的表达有关。 　　【关键词】　结肠癌；藤黄酸；多药耐药；多药耐药基因 Reversal of resistance to Oxaliplatin in human colon cancer by gambogic acid YANG Ping*, CAO Jie, TAN Ming-hua, ZHANG Tong, WANG Cheng-xing, SUN Zheng, ZHANG Wei-jian, ZENG Shan- qi. *Department of Gastrointestinal Surgery, Affiliated Guangzhou First Municipal Peoples Hospital, Guangzhou Medical College, Guangzhou 510180, China Corresponding author: CAO Jie, Email: czhongt@126.com 　　 【Abstract】　Objective To explore the effect of gambogic acid on the reversal of multi-drug resistance and the expressions of the poly multi-drug resistance protein 1 (MDR1) and P-glycopmtein (P-gp) in SW480/ L-OHP cells. Methods　Oxaliplatin resistant SW480/L-OHP cells were established by gradually increasing the concentration of L-OHP and intermittent treatment with high-dose concentration on parental cells (SW480). Methyl thiazolyl tetrazollum (MTT) method was used to detect the reversal index (RI) of SW480/L-OHP cells and the reversal effect of gambogic acid. The cell cycle, apoptosis of cells were determined by flow cytometry assay. Expression of MDR1 mRNA was detected by RT-PCR.