柱层析技术在中药材有效成分分离纯化中的应用.pdfVIP

2013年 12月第 20卷第 12期 中国中医药信息杂志 ·109· 柱层析技术在中药材有效成分分离纯化中的应用 许政,赵志强 上海中医大药业股份有限公司,上海 200231 关键词：柱层析技术；中药材；有效成分；分离纯化；综述 DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.12.049 中图分类号：R288 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2013)12-0109-02 中药材中有效成分具有显著的生理活性和药理作用,其中 2 柱层析在分离纯化有效成分中的应用 以多糖、生物碱和黄酮等的应用最为广泛。但中药材有效成分 2.1 多糖 复杂、含量低、杂质多,用常规提取法得到的提取物仍是混合 多糖是由单糖聚合形成的天然高分子化合物,是生物体内 物,需进一步分离与纯化。柱层析技术是利用物质的分子形状、 重要的生物大分子,具有抗肿瘤、免疫调节、抗衰老、抗病毒、 大小、带电状态、溶解度、吸附能力、分配系数、分子极性及 降血糖、降血脂等多种生物活性,其在医药、保健等方面用途 亲和力等理化性质的差别,使混合物中各组份以不同程度分布 广泛。目前,常用于多糖分离纯化的为离子交换柱层析、凝胶 在固定相和流动相中,使各组份逐步分离。其优点是分离效率 柱层析、吸附柱层析。在离子交换柱层析分离中药材多糖中, 高,应用物质范围广、分离条件参数选择性强、操作条件温和 常用的固定相是离子交换纤维素和离子交换树脂。 等,广泛应用于多糖、生物碱、黄酮、酶、色素、苷类、萜类 李氏等[4]在红蘑多糖分离纯化中使用了二乙氨乙基(DEAE) 等代谢产物和生物大分子的分离纯化。本文重点介绍几种柱层 纤维素离子交换柱层析,结果发现,用不同的洗脱液连续洗脱 析在中药材多糖、生物碱和黄酮的分离纯化中的应用,为中药 能收集到4个洗脱主峰,分别出现在0、0.1、0.3、1.0 mol/L 研究开发提供参考。 的NaCl洗脱部分,而0.5、0.7、1.5、2.0 mol/L的NaCl洗脱 1 柱层析的分类 部分则没有明显的洗脱峰。其纯化多糖的总量为上样量的 根据物质分离机理的不同,目前的柱层析可分为吸附柱层 71.2%。王氏等[5]利用阴离子交换树脂D315对茶多糖进行了分 析、离子交换柱层析、凝胶柱层析、亲和柱层析、疏水柱层析、 离,在 pH 值为 6.0～7.0、温度 30 ℃、上样量浓度 2.5 mg/L 分配柱层析及等电聚焦柱层析等多种类型。其中,吸附、离子 条件下,通过水和 0.5 mol/L 的 NaCl 溶液洗脱,能提高茶多糖 [1] 交换、凝胶柱层析是应用最为广泛的柱层析技术 。 的纯度,并实现初步分离纯化。 吸附柱层析是利用吸附剂对不同物质的吸附力不同而使 扈氏等[6]利用凝胶柱层析技术对沙葱多糖进行纯化,其通 4 各组份分离的方法。吸附力越大的物质,移动速率越慢。常用 过SephadexG-100凝胶柱层析,得到了分子量为5.89×10 g/mol 的吸附剂有吸附树脂、硅胶、氧化铝、聚酰胺、