蛇六谷提取物对人胃癌SGC-7901细胞MAPK信号通路的影响.pdfVIP

·254· 2013V01．20No．3 中国中医药科技2013年5月第20卷第3期May 蛇六谷提取物对人胃癌SGC一7901细胞 MAPK信号通路的影响卓 潘磊1 袁海英2陈培丰1△ (1浙江中医药大学附属第一医院·杭州3100062杭州市余杭区妇幼保健医院·杭州311100) 摘要 目的：探讨蛇六谷提取物抑制人胃癌SGC一7901细胞增殖的作用机帝j。方法：以体外培养胃癌 SGC一7901细胞为研究对象，应用westernBlot方法检测不同质量浓度的蛇六谷提取物对胃癌SGC一 790l细胞内ERK、JNK、P38表达及其磷酸化水平的影响。结果：蛇六谷提取物对胃癌SOC一790l细胞内 ERK、JNK、P38的表达无明显影响，但激活ERK、JNK和P38的磷酸化水平，并表现出良好的剂量依赖性。 结论：蛇六谷提取物可能通过激活MAPK信号通路抑制胃癌SGC一7901细胞的增殖。 主题词蛇六谷提取物／药理学人胃癌SGC一7901细g／药物作用体外研究 司。 中药蛇六谷，又名魔芋，为天南星科(Araceae)魔芋属的 多年生草本植物的统称。据《中药大辞典)…记载，该药性 2方法 寒味辛，有毒，内服有化痰消积、解毒散结、行瘀止痛等功效， 2．1 实验分组实验分为5组，即空白对照组与4个实验 外用可解毒消肿。近代该中药临床广泛用于治疗各种恶性 肿瘤，有抑制肿瘤生长、诱导肿瘤捅亡、增强免疫功能等作 验组药物质量浓度选取依据为根据前期MTT抑制率结果)。 用砼】。本课题组前期研究¨。1结果显示，蛇六谷提取物能抑 制人胃癌SGC一7901细胞、人肝癌I-IepG一2和大鼠胶质瘤 c6细胞的增殖，且呈现一定的剂量依赖性，但其具体机制尚 培养，待细胞单层铺满培养瓶后，弃旧培养液，用0．25％胰 activated 不明确。本实验拟以丝裂原活化蛋白激酶(mitogen 蛋白酶消化，待镜下细胞变圆时，加完全RPMI一1640细胞 kinases，MAPK)信号通路为切入点，探讨蛇六谷提取 protein 培养液终止消化，用吸管吹打制成细胞悬液，再将细胞悬液 物抑制SGC一7901细胞增殖的可能机理，为临床应用该药 收集于离心管中，离心弃上清液，最后将细胞重悬于完全 提供实验依据。 RPMI一1640细胞培养液中，以l：2或1：3传代培养。实验 1材料 采用对数生长期的胃癌SCC一7901细胞，将细胞接种于60 1．1 实验瘤株人胃癌细胞株SGC一7901：浙江省中医院 ×15 中心实验室惠赠。 后进入实验。 1．2药物蛇六谷：购自浙江省中医院中药房，产地为浙江 2．3蛋白提取待上述各组细胞药物作用后常规培养24 临安。称取干燥的蛇六谷饮片ll【g，用8倍量95％乙醇回流 小时，吸取上清至2ml离心管中，1200r／min离心5分钟，弃 提取，再将提取液减压浓缩，回收乙醇。用2倍量的石油醚 上清，收集悬浮于培养液中的胃癌SCC一7901细胞。每培 萃取多次，合并萃取液，负压浓缩干燥，得蛇六谷提取物浸 养皿中加15eI止RIPA裂解液，冰浴上用刮片刮取细胞至原 膏，置4。C冰箱保存备用。 2ml离心管中，冰上裂解30分钟(每10分钟震