曲霉生物膜对常用抗真菌药物的敏感性测定及其耐药的分子机制初探.pdfVIP

382 ·论著- 曲霉生物膜对常用抗真菌药物的敏感性测定 及其耐药的分子机制初探 李丽娟 陈伟许辉万结李若瑜刘伟 【摘要】 目的探讨曲霉生物膜对常用抗真菌药物的敏感性及其耐药的分子机制。方法利用微量 液基稀释法测定22株曲霉游离孢子对两性霉素B、卡泊芬净和伏立康唑的敏感性；同时建立22株曲霉 生物膜的体外模型，用抗真菌药物敏感试验联合甲基四氮盐(x7rr)减低法来评价曲霉生物膜对两性霉素 B、卡泊芬净和伏立康唑的敏感性。通过实时RT-PCR测定烟曲霉生物膜形成过程中药物外排泵基因及唑 类药物靶酶基因的相对表达量。结果对于曲霉的游离孢子，两性霉素B的最低抑菌浓度(MIC)范围是 0．5～2 mggL，卡泊芬净的最低有效浓度(MEC)范围是O．125～0．25mg／L，伏立康唑的MIC范围是0．5。 1ms／L；对于曲霉生物膜，两性霉素B的SMIC，。(抑制50％同着性曲霉生物膜生长的最小药物浓度)和 SMIC钟(抑制80％固着性曲霉生物膜生长的最小药物浓度)范围分别是2一32mg／L和8～32mCL， 卡泊芬净的SMIC50和SMIC帅范围分别是32一256mg／L和256一256mgCL，伏立康唑的SMIC50和 SMIC。范围分别是4～256 mg／L和32～256mg／L。烟曲霉生物膜形成过程中药物外排泵基因及唑类 药物靶酶基因相对表达量测定显示，与0h相比，7个待测基因在4h时表达量没有变化；8h时AfuMDRl、 CYP51A、CYP51B表达量升高，CYP51A表达量升高最明显；12、16、24h时AfuMDRl、AfuMDR2、AfuMDR4、 CYP51A、CYP51B表达量升高，其中CYP51A表达量升高的最明显；MuMDR3和atrF在生物膜形成过程 中表达量没有明显变化。结论与游离孢子相比，曲霉生物膜对两性霉素B、卡泊芬净和伏立康唑的敏感 性明显下降；烟曲霉形成生物膜以后，药物外排泵基因和唑类靶酶基因的表达量升高。 【关键词】曲霉菌属；生物膜；微生物敏感性试验；抗药性，真菌 of biofilms common anda SusceptibilitytestingAspergillusagainst antifuugMdrugs preliminarystudy onmolecularmechanismsof resistancein biofdms drug Wei, antifungal Aspergillus L／Li-juan，CHEN XU of and Hui,WANZhe，LIRuo-yu，LfUWei．MycologyLaboratory,DepartmentDermatologyVenereology, forMedical First Center PekingUniversilyHospital,PekingUniversil)，Research Mycology,Beijing100034， China author：工JU CorrespondingWei．Email：liuw90@yahoo．corn To the of biofilmstocommon 【Abstract】ObjectiveexploresusceptibilityAspergillus antifungaldrugs andmolecularmechanismsof resistanceof biofilms．MethodsThe antifungaldrug Aspergillus suscept