二元信号系统ComD-ComE与肺炎链球菌对β-内酰胺类抗生素耐药的相关性.pdfVIP

1 ·1038· ChinJMicrobiolImmun01．November2010。V01．30，No．1 生堡丝生塑堂塑鱼瘴堂塞壶!Q!Q生!!旦筮!Q鲞筮!!翅 ．细菌耐药． 二元信号系统ComD／ComE与肺炎链球菌对 13一内酰胺类抗生素耐药的相关性 樊欢严杰孙爱华 【摘要l 目的构建肺炎链球菌comD基因敲除突变株，了解cored基因与细菌母．内酰类抗生 素耐药性的相关性，探讨氯氰碘柳胺下调coreD、come和comC基冈mRNA的作用。方法构建用于 coreD基因敲除的自杀质粒pEVP3一o，通过同源孽组及插入失活获得肺炎链球菌ATCC6306株coreD 基因敲除突变株comD‘。采用PCR及免疫荧光法对coreD。突变株进行鉴定。采用实时荧光定最 RT—PCR检测氯氰碘柳胺处理前后comD一突变株及野生株comD、comE和comC基因mRNA水平变 测 化。采用二倍琼脂稀释法测定comD一突变株及野生株对青霉素G和头孢噻肟的敏感性。结果 序及免疫荧光试验结果证实，所构建的comD一突变株染色体DNA中comD基因被插入失活。50 p,moL／L或100p,mol／L的氯氰碘柳胺能明显下调comD、comE和comC基因mRNA水平(P0．05)，25 p．mol／L的氯氰碘柳胺则否。comO一突变株对青霉素及头孢噻肟最低抑菌浓度(MIC)值均为32 0eem]，明显高于野生株的0．06p。g／ml和l斗吕／IIll。结论本研究成功地构建了肺炎链球菌comD基 因敲除突变株。comO基因与细菌对p-内酰类抗生素耐药性密切相关。氯氰碘柳胺町通过下调 comD、comE和comC基因的转录水平，从而对细菌感受念形成产生影响。 【关键词】肺炎链球菌；CoreD／ComE二元信号传导系统；p．内酰胺类抗生素；耐药性；氯氰 碘柳胺；表达调控 Correlationof and resistanceof ComD／ComE antibiotics two—componentsignalingsystem Ib．1actam FAh Medical StreptococcuspneumoniaeHuan’，YANj诧。SUNAi—hua．‘Departmentof Microbiology and 310058，China Parasitology，CollegeofMedicine，ZhejiangUnwe昭ity，Hangzhou author：SUN Technical CorrespondingAi—hua，ZhejiangHigh CademyofMedicine，Hangzhou310053， China．Email：Medpb@彳地础k．m To acomD knock-outmutantof 【Abstract】objectivegenerate gene Streptococcuspneumoniae， anddeterminethecorrelationofcoreD andthebacterialresistanceB．1actamantibioticsandan． gene against derstandtheeffectofclosantel coreD．comeandcornCmRN