高三尖杉酯碱诱导的白血病耐药细胞基因表达谱的变化.pdf

生堡查适芏盘查!Q塑生!旦筮塑鲞笙!翅堕!!』丛!堂!!!：』!堕!Q塑：!型：!Q：盟!：鱼 论著· 高三尖杉酯碱诱导的白血病耐药细胞 基因表达谱的变化 于晓林刘永王涓冬孔德晓 陈春燕 【摘要】 目的探讨高三尖杉酯碱(HHT)诱导的人白lf『L病细胞耐药相关分子。方法在前期 建寺的HHT诱导的人白血病多药耐药细胞株K562／HHT的基础上，采用基因芯片技术比较K562／ Ru486)细胞三者基冈表达谱的差异，选择在这三种细胞中呈动态变化的骨髓细胞x染色体上酪氨酸 激酶(BMX)基因用RT．PCR和Westemblot法在转录和翻译水平进行验证，进而转染BMx基冈到 I(562和K562／HHT细胞，观察BMx过表达时这两种细胞内柔红霉素(DNR)含量的变化，确定BMx 耐药细胞K562／HHT与其亲本l(562细胞相比， 是否在l(562／HHT细胞耐药形成中发挥作用。结果 共有“7个基因表达有显著差异，其中57个基因表达明届L调，60个基因表达明显下调，耐药细胞 个基冈表达明显上调，37个基因表达明显下调。这些差异表达的基冈涉及耐药、细胞信号传导、细胞 033642(FCFl3)和AL049309(sFRsl2)在两组芯片中的表达均有显著差异。其中BMx基因在K562／ HHT细胞中的表达与K562细胞相比，明显上调，在I(562／HHT／RU486细胞则较K562／HHT细胞减 低。进一步用RT．PCR和westemblot法检测得到了相问的结果。RT-PcR和Westemblot证实BMx 质粒转染的l(562及K562／HHT细胞BMx表达均上调，流式细胞术检测到l(562及I(562／HHT细胞内 DNR含量荧光强度分别为79．28±4．04和29．84±2．67，均较转染前荧光强度158．52±8．08和 58．58±6．53显著减低。结论BMx在高三尖杉酯碱诱导的人白血病多药耐药细胞株l(562／HHT耐 药性产生中发挥作用。 【关键词】 K562细胞；抗药性，多药；基因芯片；高t尖杉酯碱；基因，BMx in leukemia cen Chang鹤ofgene homohar—ngtolline-inducedmuIti-dn曜r髂istant expressionprofne Ⅱnel(562／HHT yUX此m．Zin 4，U“％馏，黝～G‘，眦，1．‘zD昭，K0ⅣGJDe一戈i∞。CHE_~吼“凡一妒凡’． 250012，ChiM ‘Depn咖忱m《HeHmtok)gy，QtluH0s呻越西skndongUn陂rs缸y，如m cor，邯加蒯i，珊Ⅱ“琥or：CHEⅣChⅡ，1．佃n．E，凇甜：ck船，@sd“．e也．cn mlatedmoleculesofhuman resistantK562 To theresistant leukemia(1rug 【Abstract】obiectivestudy Metho【IsGene onK562／ cells(K562／HHT)inducedbyhomoharringtt’nine(HHT)．expressionpm6les were DNAmicma卜 and reversedRU486)cellsdetected HHT。l(562K562／HH’r／RU486(K562／HHTby by bone inchmmosomewhich the m㈣w