HO-1基因表达对伊马替尼耐药的慢性髓系白血病细胞增殖的影响.pdfVIP

·388- ·论著· HO一1基因表达对伊马替尼耐药的 慢性髓系白血病细胞增殖的影响 王季石 柴柏胜 方琴何颖颖 陈埕杨畅 【摘要】 目的通过氯高血红素(Hemin)诱导伊马替尼耐药慢性髓系白血病(CML)细胞株 K562／A02一IM中血红素加氧酶一1(HO—1)基因表达，探讨HO一1基因对伊马替尼耐药CML细胞增殖的 影响，为治疗CML多药耐药及新药的开发提供思路和实验依据。方法采用RT．PCR法检测20例 CML伊马替尼耐药患者骨髓细胞中HO—l基因的表达，半定量RT—PCR法和Westernblot法分别检测 不同剂量Heroin处理K562／A02-IM细胞不同时间后HO一1的表达，通过AnnexinV／PI双染色法检测 细胞凋亡情况，采用M1Tr法检测Hemin诱导及锌原卟啉抑制HO-1表达与细胞存活率的关系。结果 RT—PCR结果显示耐药患者骨髓细胞中HO-1基因阳性表达，半定量RT-PCR和Westernblot法显示， 不同浓度的Hemin(0、10、20及40ixmol／L)处理K562／A02-IM细胞16h后，HO．1的表达量随Heroin h 浓度的升高而增加，存在剂鼍依赖关系，而20limol／LHemin分别处理K562／A02一IM细胞0、8、16、24 后，HO-1的表达量在处理16h组最高。AnnexinV／PI法检测显示，0、10、20及40Hemin作用 Ixmol／L 于K562／A02一IM细胞16h后细胞凋亡率分别为(17．61±0．01)％、(12．13±0．11)％、(7．94± 0．03)％和(4．62s0．15)％，其抗凋亡的作用旱剂量依赖性；20I．LmoVLHemin作用K562／A02一IM细胞 8、16及24 h的细胞凋亡率分别为(14．72±0．05)％、(8．15±0．07)％和(16．37±0．13)％。MTF法检 测显示与对照组相比，Hemin诱导K562／A02-IM细胞HO—l基因表达促进了细胞的增殖，且作用存在 剂量依赖关系；而锌原卟啉抑制HO—l的表达，促进了细胞的凋亡(P0．05)。结论CML伊马替尼 耐药患者骨髓细胞HO．1基因阳性表达，HO一1是一种可诱导表达型基因，具有抗细胞凋亡及促进细胞 增殖的作用，抑制HO．I表达町能成为治疗CML耐药的新方法。 【关键词】 血红素加氧酶一l； 氯高血红素；伊马替尼耐药；K562／A02一IM细胞；细胞凋亡 EffectsofHO-l resistant on ofimatinib CMLcellsWANGJi—shi．CHAI geneexpressionproliferation Eh Bai—sheng，FANGQin，HEY诫g—ying。CHCheng．YANGChang．DepartmentofHematology．Affiliated Gui Medical of 550004．CAina HospitalYang College．Guiyang To theeffectofheme oncell 【Abstract】Objectiveinvestigate oxygenase·1(H0—1)expression and inimatinibresistantchronic ex． growthapoptosis myeloidleukemia(CML)cells(K562／A02．IM)．and the betweenH0．1 andCML．MethodsThe ofH0．1in20 plorerelationship