探针熔解分析法快速检测结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药突变.pdfVIP

·130· ．临床微生物学． 探针熔解分析法快速检测结核分枝 杆菌乙胺丁醇耐药突变 郑蓉蓉 陈晓云付军 张向东 温慧欣胡思玉 牛建军 李庆阁 【摘要】 目的评价探针熔解分析法快速检测结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药突变的应用价值，为 临床检测提供指导依据。方法613份痰标本于2009年9月至2010年4月收集自厦门市疾病预防 控制中心、厦门市第一医院和漳州市疾病预防控制中心。结核分枝杆菌H。Rv标准株来源于国家结 核病参比实验室。37株包含结核与非结核分枝杆菌的标准盘由中国药品生物制品检定所提供。首 先采用梯度稀释的野生型标准株心，RvDNA考察探针熔解曲线分析法的分析灵敏度，然后用标准盘 验证其检测特异性，最后以测序法为对照方法，采用613份结核分枝杆菌的标本评价该方法的临床应 用价值。结果探针熔解分析法可检测到3拷贝／反应，且能特异检测结核分枝杆菌。613份结核分 枝杆菌的检测结果显示，符合要求的583份标本的试剂盒检测结果与测序结果完全一致，其中embB 497 306突变菌株数为34株，embB378-380突变菌株数为23株，embB406突变菌株数为3株，emb8 突变菌株数为3株。结论探针熔解分析法检测结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药突变特异性好，灵敏度 高，能有效地检测临床标本常见乙胺丁醇耐药突变位点，是值得推广的快速检测方法。 【关键词】分枝杆菌，结核；乙胺丁醇；抗药性，细菌；突变；聚合酶链反应 Probe for detectionofethambutol-resistantmutatiominMycobacterium meltinganalysismpid tuberculosisclinicalisolatesZHENG Rong-rong‘。CHENXiao—yun。FUJun。zHANGXiang-dong． WEN CenterDiseaseControland Hui·xin．HU for Prevention， Si—yu。NIUJian-jun。12Qing-ga‘Xiamen Xiamen361021．China author：NIU corn CorrespondingJian-jut，Ema／／：，“谚@xmcda Toevaluatethe useofa in potential analysis(PMA)assay 【Abstract】0bjective probemelting theembBnmtafiomwhichconferresistanceagainstethambutolin tubercu／os／s．blethods detecting Mycobacter／um 鸭e and ofPMAwere a dilutedRvDNA analysissensitivityspecificity investigatedbydetectingserially H37 andareferencefromNationalInstitutefortheControIofPharmaceuticaland Product．Six panel Biological hundredandthirteen werecolicctedfromtheXiamenCenterforDiseaseContreland sputumsamples