四种真菌毒素检测方法建立以及赭曲霉毒素A脱除方法初步与研究.pdfVIP

四种真菌毒素检测方法的建立以及赭曲霉毒素A脱除方法的 初步研究 摘 要 真菌毒素，是某些真菌产生的代谢产物或二级代谢产物，通常存在于霉变的 谷物中，一旦通过食物链进入人体后，将可能造成致畸，致突变和致癌等严重危 害，因此在全球食品安全中备受关注。目前，真菌毒素的检测方法较多，其中高 效液相色谱法精密度最高。本论文按照真菌毒素研究学者普遍认同的菌属产毒的 分类方法，针对不同菌属产生的真菌毒素具有分子结构式相似的特点，选出具有 代表性的四种真菌毒素，同时针对不同的食品，系统的建立了这四种真菌毒素的 免疫亲和层析高效液相色谱的检测方法，方法操作简便、准确，回收率高、精密 度良好、重现性好，最终并且初步研究了赭曲霉毒素A的微生物脱毒方法。 赭曲霉毒素A的免疫亲和层析高效液相色谱的检测方法的建立。经甲醇．水 或碳酸氢钠．水溶液提取，提取液稀释过滤后经过含有赭曲霉毒A特异性抗体的 免疫亲和柱层析净化，洗脱液用C18色谱柱分离，荧光检测器测定。流动相为 外标法定量，结果表明，色谱峰面积与含量之间有良好的线性关系，方法的检出 限为0．2pg／kg，加标回收率为90．3％～106％，对不同浓度的样品相对标准偏差 RSD为1．75％～4．32％。 T-2毒素的免疫亲和层析高效液相色谱的检测方法的建立。经甲醇．水溶液 提取，提取液稀释过滤后经过含有T-2毒素特异性抗体的免疫亲和柱层析净化， 洗脱液用C18色谱柱分离，用1～葸腈(1-AN)来将其衍生，荧光检测器测定。 20rd；#b标法定量，结果表明，色谱峰面积与含量之间有良好的线性关系，方法的 差RSD为1．9％～5．6％。 玉米赤霉烯酮的免疫亲和层析高效液相色谱的检测方法的建立。试样经乙腈 一水溶液提取，提取液稀释过滤后经过含有玉米赤霉烯酮特异性抗体的免疫亲和 柱层析净化，洗脱液用C18色谱柱分离，荧光检测器测定。流动相为乙腈：水：甲 量，结果表明，色谱峰面积与含量之间有良好的线性关系，方法的检出限为 为5．0％～11．6％。 呕吐毒素的免疫亲和层析高效液相色谱的检测方法的建立。试样经聚乙二醇 水溶液提取，提取液稀释过滤后经过含有呕吐毒素特异性抗体的免疫亲和柱层析 净化，洗脱液用C18色谱柱分离，荧光检测器测定。流动相为甲醇：水为20：80； 检测波长218nm；柱温35C；进样量50pl；外标法定量，结果表明，色谱峰面积与 含量之间有良好的线性关系，方法的检出限为0．1mg／kg，加标回收率为65．8％～ 85．9％，对不同浓度的样品相对标准偏差RSD为3．1％--6．8％。 此外本实验发现，红发夫酵母对赭曲霉毒素A的脱除效果最为理想，可以 将赭曲霉毒素A转化为赭曲霉毒素a，另外对红发夫酵母对赭曲霉毒素A的脱 毒条件进行了优化，发现红发夫酵母在30摄氏度可以保持较高活性，脱毒13 天，温度在25--35摄氏度时红发夫酵母对赭曲霉毒素A的降解率最高，可以达 到80％以上。 关键词：赭曲霉毒素A 1-2毒素 玉米赤霉烯酮 脱氧镰刀菌烯 醇 检测 脱毒 TheResearchofDetectionMethodsofFour And Mycotoxins DetoxificationMethodofO劢． Abstract isthe metabolic of in Mycotoxinsecondary productfungus，oftenexisting human’S causeserious moldygrains．Onceentering body,itmay danger，like orcancerandSO is in concerne