干扰素联合利巴韦林治疗对Huh7细胞微RNA122表达的影响.pdfVIP

生堡篮銎瘟盘查!Q!!生!旦复21鲞箍§翅￡堑g』!g!墼!毯!!丛!!业gQ!Q!∑!!：2§：塑Q：§ ·129· ● 基础论著 干扰素联合利巴韦林治疗对Huh7细胞 2 微RNAl2表达的影响 龚邦东 谢青 王琳 项晓刚 量志霞 林兰意 赵钢德 王晖 郭清 【摘要】目的探讨IFNfl联合利巴韦林(RBV)治疗对肝癌细胞株Huh7的微RNAl22表达 的影响。方法Huh7细胞分别经过单用不同剂量RBV处理3 h。以 d、单用不同剂量IFNfl处理4 及IFN8联合RBV处理后，采用噻唑蓝(MTT)法检测其生长曲线，RT—PCR法检测IFN诱导基 因54(ISG54)的表达，然后分别以小核核糖核酸6(U6)和单位细胞数为内参照，茎环结构实时PCR 检测微RNAl22表达变化。数据比较采用单因素方差分析，两两比较采用q检验。结果MTT结 果显示，RBV能以剂量依赖方式抑制Huh7细胞增殖，而IFNB仅能轻微地且不能以剂量依赖方式 mRNA 抑制Huh7细胞增殖。RT-PCR结果显示，IFNl3能以剂量依赖方式诱导Huh7细胞ISG54 mRNA表达。以U6为内参照， 表达，而RBV单用和联合IFNl3均不能以剂量依赖方式诱导ISG54 100 在RBV终浓度为3．125mg／L时，联合lFN8U／mL和1000U／mL，微RNAl22相对表达量分别 为0．770±0．082和0．720士0．045，与单用IFNl3组相比，差异有统计学意义(口=4．623，q=5．112；均 P0．05)。提示存在协同效果，而在RBV终浓度为6．25mg／L和12．5mg／L时无协同效果。以细胞 数为内参照，RBV单用和联合IFNl3均能下调细胞微RNAl22表达，以RBV终浓度为3．125mg／L 10U／mL、100U／mL和1000U／ml。时，微RNAl22相对表达量分别为0．680± 明显，联合IFNB 0．055、0．560土0．084和0．610±0．030，与单用IFNl3组相比，差异有统计学意义(F一4．121，P 0．05)，亦提示存在协同效果。结论RBV在终浓度为3．125 mg／L时，能协同IFNl3下调Huh7细胞 微RNAl22表达，这可能为临床上RBV提高IFN抗HCV疗效的一个新的分子机制。 【关键词】微RNAs；利巴韦林；干扰索B；药物协同作用；基因表达；癌，肝细胞 Effectsofinterferonand on inHuh7cells ribavirincombination mieroRNAl22 therapy expression GoNG Lin．xIANG Zhi-xia。LIN Bang-dong，XIEQing，wANG Xiao-gang，DoNGLan-yi， ZHAO Gang—de，WANGHui，GUO Qing．DepartmentofInfectiousDiseases，RuijinHospital， School 200025，China JiaotongUniversity Shanghai ofMedicine，Shanghai author：XIE CorrespondingOing，Email：xieqingrj@yahoo．com．cn To theeffectsof ribavirin(RBV) [AbstractlObjective