益气活血方含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的影响.pdfVIP

环球中医药2014年5月第7卷第5期　 Global Traditional Chinese Medicine,May2014,Vol．7,No．5 　　327 pacts of Cardiovascular Risk Factors on Oxidative Stress [J], [8]　 E. R.Miller,R. Pastor-Barriuso,D. Dalal,et al. Meta-analysis: Sci. 2011,12(9):6146-6163. high-dosagevitamin E supplementation may increase all-cause mor- [7]　 G. Bjelakovic,D. Nikolova,R. G. Simonetti,et al.Antioxi- tality[J]. Annalsof Internal Medicine,2005,142(1):37-46. dant supplementsforpreventionof gastrointestinalcancers:asys- (收稿日期:2013-12-28) tematic review and meta-analysis[J]. The Lancet,2004,364 (本文编辑:秦楠) (9441):1219-1228. 益气活血方含药血清对大鼠骨髓间充质干 细胞体外增殖的影响 黄凤　 段行武　 董建勋　 李健　 荣培晶　 徐旭英 【摘要】　 目的　 探讨益气与活血中药含药血清对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs )增殖能力的影响。 方法　 全细胞贴壁培养法获取、纯化BMSCs,体外培养,建立 大鼠骨髓间充质干细胞的培养体系,采集空白对照大鼠、益气药、活血药、益气活血中药灌胃大鼠含 药血清,用10%浓度以上不同含药血清培养第三代BMSCs,置于37℃,5% CO 培养箱中孵育。 用流 2 式细胞术鉴定BMSCs。 噻唑基四唑比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)测细胞活性,绘制生长 曲线,观察10%益气、活血、益气活血中药含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的影响。 结 果　 采用全骨髓贴壁法获取的BMSCs,经流式细胞术检测,CD44、CD106 呈阳性表达,基本不表达 CD45、CD34;MTT法检测结果显示,培养第 2、4、5 天细胞快速增长,均较前一天增长明显(P 0．05),第6天时活血方血清组与益气活血方血清组细胞增长已呈下降趋势,而其它三组在第6天细 胞增长达最大,与前一天比较仍有差异(P 0．05),到第7 天呈下降趋势。 BMSCs去除基线增殖率 组间比较,培养第2天时,各组间比较虽无差异,但活血方血清组达最大(71．39±4．98%);第4、6天 时,益气活血方组达最大(66．40±1．47%),与其它三组比较P 0．01,活血方血清组次之;培养第6 天时,益气方血清组较其它三组大,益气活血方血清组次之,活血方血清组最低。 结论　 全细胞贴 壁培养的大鼠骨髓间充质干细胞在细胞形态与表形表达上均具备BMSCs特征;益气活血中药含药 血清对培养BMSCs增殖影响最大,活血方含药血清对细胞增殖影响出现最早、益气方含药血清对细 胞增殖影响时间最长。 【关键词】　 骨髓间充质干细胞;　 细胞培养;　 体外培养;　 益气活血中药 【中图分类号】　 R285．5　 【文献标识码】　 A　 doi:10.3969/ j.issn.1674-1749.2014.05.002 Effect of qi-tonifying andblood-activating Chineseherbserumonproliferationof SDratbonemar- row mesenchymal stem