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分子标记辅助选择在水稻抗病育种研究进展
官华忠
摘要:随着水稻高密度分子遗传图谱的构建和重要农艺性状的基因或QTL的定位,分子标记辅助选择逐渐用于质量和数量性状的遗传改良。本文综述了分子标记辅助选择在水稻抗稻瘟病、抗白叶枯病和抗细菌性条斑病的育种应用的研究进展,存在的问题和展望。
关键词:分子标记辅助选择,水稻育种,稻瘟病,白叶枯病,细菌性条斑病
水稻是全球重要的粮食作物之一,全世界有25亿以上的人口主食大米,其中中国是世界上最大的水稻生产和消费国,1533.33万hm250%,而产量则占水稻总产的近60%[1],为我国粮食生产做出了巨大贡献。
然而,水稻病害的危害一直严重地影响着水稻生产。水稻病害种类很多全世界有近百种我国正式记载的达如Yu等用感病籼稻Co39为遗传背景导入5173和Tetep的抗稻瘟病基因采用短日高温处理快速加代法获得B6F4重组自交系群体(RILs)定位了Pi-2(t)和Pi-4(t)随后Mew等[11]进一步精细定位了这两个基因i-1定位在RFLP标记RZ536和SSR标记RM144之间,图距分别为9.7和6.8cM。吴金红等[13]进一步将Pi-2定位于分子标记RG64和AP22之间,图距分别缩小到0.9和1.2 cM。Wang[14]用Co39为感病材料导入持久抗瘟性品种Moroberekan 的抗稻瘟病基因构建重组自交系于F7代用127个RFLP标记检测抗病池和感病池定位了Pi-5(t)和Pi-7(t)Pi-15定位于第9号染色体。除了对抗稻瘟病主基因定位外,近年在稻瘟病抗性QTL的分子标记定位方面也取得较大的进展。目前已国内学者已采用多种方法定位了80个以上与稻瘟病数量性状抗性相关的QTL[18-22]。这些抗性基因/QTL的分子标记定位是稻瘟病抗性的分子标记辅助育种和抗性基因或QTL的克隆的重要前提。如在分子标记定位的基础上,人们采用图位克隆的方法成功克隆了水稻抗稻瘟病基因Pi-ta[23],Pi-b[24],Pi-9[25]和Pi-Kh[26]。
虽然有较多的稻瘟病抗性/QTL的分子标记定位已完成,但已成功应用于育种的稻瘟病抗性基因只有少数几个主效基因,如Pi-1,Pi-2,Pi-9,Pi-d,Pi-z5和Pi-ta等。李仕贵等[27]应用与稻瘟病抗性基因Pi-d(t)RM262对含有该抗病基因的品种地谷与感病品种江南香糯和8987的F2群体进行MAS选择,结果发现应用该标记选择纯合和杂合带型抗性植株的准确率可达98%以上。Hittalmanni等[28]在以一个抗稻瘟病基因Pi-z5两侧连锁标记的辅助选择中,发现纯合抗病F2植株选择的准确率达100%。Liu等[29]通过分子标记辅助技术将广谱抗稻瘟病基因Pi-1导入到珍汕97BPi-2从供体材料5173导入到迄今广泛使用的雄性不育保持系珍汕97B中,获得了一批携有Pi-2的珍汕97B近等基因系。Pi-1、 Pi-3),BL23(Pi-2、 Pi-3)和BL123(Pi-1、Pi-2、Pi-3)的近等基因累加系。Hittalmanni等[33]用MAS对水稻稻瘟病抗性基因Pi-1、Pi-z5和Pi-ta进行累积,含有Pi-z5的2个或3个抗性基因的聚合比单独存在时抗性增强,能感染单个基因的兼性生理小种不能侵染抗性基因累加的品系,说明非等位基因有互补作用。陈学伟等[34]通过对地谷,BILl,Pi-4号等三个分别含抗病基因Pi-d(t) 、Pi-b、Pi-ta 的稻瘟病抗性材料与G46B聚合杂交,并利用抗病基因连锁的分子标记对杂交后代进行辅助选择,在聚合杂交的F2代及BlCl代群体中共获得了l5株含Pid 、Pi-b、Pi-ta 等三个抗稻瘟病基因的材料,该研究结果表明利用分子标记可快速、有效地实现多个抗病基因的聚合,大大提高水稻抗病育种的效率。
对于稻瘟病抗性QTL位点虽已有不少定位的报道,但未见将其应用于育种的上的报道。
2.2 抗白叶枯病的MAS
目前已鉴定和定位的白叶枯病抗性基因如白叶枯病抗性基因染色体SSR标记OSR06和RM224附近图距分别为5.3cM和27.7cM此后潘海军等用Xa23的近等基因系CBB23及其感病轮回亲本JG30构建了包含2562个单株的F2作图群体通过分析571个感病单株找到2个新的与Xa23基因连锁的SSR标记RM187和RM206它们与Xa23之间的遗传图距分别为71cM和19cM。通过筛选1200个RAPD引物获得2个与Xa23基因连锁的RAPD标记RpdH5和RpdS1184与Xa23之间的遗传图距分别为70cM和76cM;王春连等[37]将Xa23定位于两个EST标记C189和CP02662之间,图距分别为0.8和1.3 cM。高东迎等[38]利用RAPD标记对从体细胞突变体HX-3中鉴定出的抗水
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