利用OsPDCD5作为选择标记与目基因共转化法构建无标记转基因水稻.pdf

目 录 目 录 摘要……………………………………………………………………III Abstract……………………．…．………………．…．………………………．………．……………．………．…………iv l 引言……………………………………………………………………………………1 2文献综述…………………………………………………………………2 2．1 转基因植物中的选择性标记基因…………………………………………………一2 2．1．1传统选择性标记……………………………………………………………………2 2．1．2安全标记基因………………………………………………………………………2 2．1．3标记基因的去除……………………………………………………………………．3 2．2 2．2．1程序性死亡…………………………………………………………………………5 2．2．2 2．3水稻耐盐的研究……………………………………………………………………．．6 2．3．1水稻耐盐QTLs……………………………………………………………………．6 2．3．2 anti．OsPDCD5基因提高水稻耐盐性……………………………………………．7 2．4富亮氨酸重复类受体蛋白激酶基因LRK的研究…………………………………．7 2．4．1 LRK的组成结构与特征……………………………………………………………7 2．4．2LRK基因的生物学功能……………………………………………………………7 2．4．3 LRKl基因潜在的增产价值………………………………………………………．8 3材料和方法……………………………………………………………9 3．1材料用品……………………………………………………………………………一9 3．1．1水稻转化受体………………………………………………………………………9 3．1．2载体与菌株…………………………………………………………………………9 3．1．3主要试剂…………………………………………………………………………．．10 3．1．4组织培养基………………………………………………………………………．10 3．1．5仪器与设备………………………………………………………………………．10 3．1．6分析软件…………………………………………………………………………一ll 3．2试验方法……………………………………………………………………………．1l 3．2．1 3．2．2水稻愈伤组织的诱导与处理……………………………………………………．12 3．2．3基因枪转化目的基因……………………………………………………………．13 3．2．4热激转化植株……………………………………………………………………．14 4结果与分析……………………………………………………………………．．15 lfl 录 4．1共转化的目的DNA获得…………………………………………………………．15 4．1．2获得转化植株的外源DNA片段…………………………………………………16 4．2水稻的转化结果……………………………………………………………………一16 4．2．1愈伤组织的培养及转化后再生……………………………………………………16 4．2．2T0代转化植株的PCR检测结果…………………………………………………．16 4．3热激阳性植株的反应………………………………………………………………．．17 5小结与讨论…………………………………………………………．18 5．1水稻愈伤组织的培养效率…………………………………………………………18 8 5．2高浓度潮霉素抑制分化……………………………………………………………1 5．3共转化效率的选取…………………………………………………………………18 参考文献………………………………………………………………一20 致谢………………………………………………………………………………………24 II 摘要 摘要