新生大鼠持续炎症伤害性刺激对成熟后痛敏感性和脊髓NGF-TrKA、BDNF-TrKB、IL-1β-COX2表达影响效果.pdf

新生大鼠持续炎症伤害性刺激对成熟后痛敏感性和脊髓NGF—Trl溘、 BDNF—TrkB、II广1B．C0x2表达的影响效果 硕士研究生：李萌萌 导 师 张英民教授陈军教授 第四军医大学西京医院麻醉科 基础部解剖掌教研室暨梁铼琚脑研究中心 摘 要 近年来，实验研究发现新生儿受到伤害性刺激时，可以影响到他们成年后痛感受能力． 固此对疼痛的胚胎和生后发育分子与细胞生物学的深八研究具有重要的临床意义。虽然目 前临床和少数基础研究资料已经显示新生大鼠生后持续伤害性刺激可导致痛行为异常和 脊髓背角灰质结构重塑，但是在以下方面尚缺乏系统研究资#：(1)新生持续伤害性刺激 对成熟动物不同病理性痛行为(持续性自发痛、原发性热或机械痛敏、继发性编敏)的影 的发育是否有影响?为了阐明以上问题，本买验应用具有多样，I$床病理性痛特征的蜜蜂毒 动物痛模型和常规ABc法免疫组织化学染色技术对上述问题在以下四个方面进行了系统研 究，其结果如下： 一、 新生大鼠基础热刺激缩足反射潜伏期、机械刺激缩足反射闽值及外周化学组织损 伤诱致新生大鼠持续自发痛反应和原发性热痛敏或机械痛敏的年龄变化特点 l 的基础热刺激缩足反射潜伏期(PwTL)和机械刺激缩足反射阈值(PwMn。基础 PwTL在P1时最低，随着生后年龄增长而增高，至P7日÷达到最高峰，此后在 P7．P28发育期问4稳．基础PwMT在P1．P21发育期间极低且保持平稳，动物表 现为对机械刺激高度敏感。从P21．28发育期间，PwMT逐渐增高，且在P28时 比P1．P21期间的PwMT均值增高了lO倍。 2． 下注射蜜蜂毒)诱致新生大鼠持续自发痛反应其结果是：新生大鼠自P1开始对 皮下注射蜜蜂毒已具有自发痛反应，而且随着蜜蜂毒浓度增高，动物1小时自发 缩足反射次数的平均总数增多，提示皮下注射蜜蜂毒对新生大鼠持续自发痛反应 具有浓度依赖性作用。且对每个生后年龄蜜蜂毒最大剂量．反应浓度纽进行1小 时时程观察，发现P1一P28新生大鼠对皮下蜜蜂毒的反应形式，与成年相似，呈 现单相反应形式。 3 致新生大鼠热痛敏的发生，非伤害性刺激(皮下注射生理盐水)和伤害性刺激(皮 下注射蜜蜂毒)均可导致P1．P14动物的PwTL下降．但是从P14动物开始具有 分辨痛刺激的能力，因为此年龄只有蜜蜂毒才引起Pwn下降，而生理盐水对 。 PwTL无显著影响。接受外周伤害性和非伤害性刺激的新生大鼠在P1．21均表现 对机械或触刺激超敏感，但在P21之后，只有蜜蜂毒才可以引起PwMT下降， 而生理盐水别对PwMT无影响。 二、 新生不同年龄大鼠外周化学组织损伤处理对其成熟后基础热刺激缩足反射潜伏期 或机械刺激缩足反射阈值及持续自发痛反应和痛敏的影响效果 1 在新生Pl、P4、P7、P14、P21和P28给予皮下蜜蝰毒或生理盐水剌激之后，使 动物成活至2-3个月(成年)分别测定每只大鼠基础PwTL’PwMT。成熟大鼠 基础PwTL组间无显著差异(P0 05)，但基础PwMT在P21以前经Bv处理 PwMT显著降低(PO叭)。 2 对上述成年大鼠在原损伤部位再次注射蜜蜂毒造成局部组织2次损伤，结果表明 新生不同年龄给予伤害性刺激对成年2次伤害性刺激引起的持续性自发痛均具有 增强作用． 害性处理和非伤害性处理对成年大鼠原损伤部位再次局部组织损伤所诱致的热 痛敏的影响无显著差别，提示成年大鼠热痛敏发生的程度不受新生伤害性刺激经 历的影响。但是，新生P4．21给予蜜蜂毒处理的成年大鼠不出现蜜蜂毒诱致的机 械痛敏或触诱发痛，而成年大鼠皮下蜜蜂毒再处理仍可在新生生理盐水处理的部 位引起原