基于链置换反应的DNA等温扩增技术应用进展.pdfVIP

· 24 · 医学综述2010年 1 第 l6卷第 1期 MedicalRecapitulate，Jan2010，Vo1．16，No．1 基于链置换反应的DNA等温扩增技术应用进展 ， 何 艳 (综述)，蒋 涛 (审校) (南华大学，Ii物化学 j分子生物学教研摩，湖南衡阡】421001) 中图分类号：Q78 文献标识码 ：A 文章编号：1006．2084(2010)01-0024-04 摘要：DNA等温扩增是在恒定温度下用非热变性的方法解开DNA双链 的一种扩增技术。链置 只切割未被修饰的那条链 ， 换反应指某些具有链置换活性的DNA聚合酶在延伸新链 的同时将下游 旧链剥离，它已被用于多种 因而产生单链缺 口。在最初 体外等温扩增技术，包括链置换扩增、滚环扩增、多重置换扩增、环介导的等温扩增等。其主要应用 的SDA设计 中，DNA模板须 于DNA测序、全基因组扩增、基因芯片、微生物病原体检测等领域。 关键词：等温扩增；链置换扩增；滚环扩增；多重置换扩增；环介导的等温扩增 先经限制性酶切割，而后热 ApplicationProgressofDNA IsothermalAmplificationBasedonStrandDisplacementReaction HE 变性产生两条单链 片段 Yah，JIA Tao．(DepatementofBiochemistryandMolecularBiology，NanhuaUniversity，Hengyang4210o1， (T1， )；两个含有 HinclI China) Abstraet：Isothermalamplificationexploitsstrategiesotherthanheating．denaturationtounwinddouble． 识别序 列 (5一GrlTGAC3·) st~ndedDNA．Stranddisplacementissuchaprocessinwhichnew DNA synthesisstartsatanickbydispla． cingdownstream strandwhilecxtention．SeveralstrategiesofDNA isothermalamplification 的引物 (P1，P2)与内切酶切 ． including strand displacementamplification，rollingcircleamplificationmuhipledisplacementamplification loop—mediatedi． ， 割后的目标片段上下游末端 sothermalamplification，havebeendevelopedbasedonstranddisplacementreaction ． Andthesemethodshave beenappliedinDNA sequencing，wholegenomeamplification，microarrayfabricationandpathogendetection． 分别退火；无外切酶活性的 Keywords：Isothermalamplification；Stranddisplacementamplification：Rollingcircleamplification： 大肠埃希菌 DNA聚合酶 I Multipledisplacementamplification：Loop．mediatedisotherma】amplification