人巨细胞毒对脐血淋巴系祖细胞外增殖影响及干预研究.pdf

人巨细胞病毒对脐血淋巴系祖细胞体外增殖的影响及 干预研究 摘 要 目的；本课题主要探讨人类巨细胞病毒(HCMV)对脐血淋巴系祖细 感染的CFU-TL的体外增殖抑制的影响。方法：1．采用的20例脐血标本均 来自本院附属医院产科，为正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐带血。 2．采用甲基纤维素半固体培养法培养造血祖细胞，以3种不同浓度 感染后CFU-TL的集落产率、集落抑制率、集落峰期及维持时间。3．参照 细胞增殖活性的影响。4．流式仪测定培养前后相应表面抗原B淋巴细胞百 分率和瑞氏染色来鉴定CFU．TL集落细胞成分；5采用MTT法检测不同浓 养液稀释成20ug／ml、15ug／ml、l 时观察、计数其CFU-TL集落数、集落峰值及维持时间：7．试验分组：采用 病毒持续感染细胞方法。试验分为(1)空囱对照组：不加HCMV瘸毒液，代危 等量驹1640培养液，(2)灭活对照组：加入两体积豹灭活病毒液，排除病毒 加入CFU．TL体系中共同培养。(4)鼗芪对照级：在培养体系中加入 洛韦，终浓度为7．5ug／ml。(6)黄芪组：在l：lO感染组中加入黄芪注射液， 入黄茂注射液和爨昔洛韦，浓度同上。8浮L酸脱氢酶(L明)释放率的测定： 细胞接种及分组阿前，用全翻动生化仪梭测上清液巾的LDH滔性，然后用 反复冻融法使缩胞完全裂解，吸取各孔细胞裂解液，按照上述方法检测裂 结果燧均数热减标准差一(x±s及攘测攀帮增值搴表示。进行方差齐蛙梭 验，方差分析。谢统计学意义后，组间均数两两比较用SNK法。由统计学 软件SPSSl0．0亮浅。结果：1．与空白对照缀和灭活对照组比较，备病毒感染 度与瘸毒感染滴度呈剂量浓泼依赖关系；而灭活对照组与空白对照组无显 著蒸髯。2。空蜜对照组察灭滔对照缰篦较，集落维持潜阗差茹笼统诗学意 CFU-TL集落维持时间与空白对照组和灭活对照组比较无统计学意义 系：空白对照组和灭活对照组比较，CFU-TL集落峰值出现时间差异无统计 学意义。与空白对照组和灭活对照组比，各感染组CFU-TL集落出现峰值 0．88。结果表明HCMV感染后在早期促进细胞增殖；而96小时后可抑制 染的CFU．TL后，细胞膜损伤减轻，说明该药可能具有稳定细胞膜蛋白的 证明集落组成细胞中绝大部分细胞为T淋巴细胞。6．PCR检测到CFU．TL 150ug／ml。我们探讨黄芪在体外是否有抗HCMV作用，选取无促进造血作 组无明显差异。结论：1．淋巴系造血祖细胞是HCMV的靶细胞之一，HCMV 的增殖和分化。2．HCMV感染导致淋巴系祖细胞增殖抑制，并且使之受到 损伤，此作用可能与临床上HCMV感染所致的造血功能抑制、免疫功能低 感染所致的淋巴系造血祖细胞增殖抑制的发生。二者联用能产生协同的抗 HCMV作用。 关键词：巨细胞病毒；淋巴系祖细胞；黄芪；更昔洛韦 TheEffectof Human onthe Proliferationof Cytomegalovirus andthe Lymphocyte Interference Progenitor ResearchinVitro theeffectandthe Abstract：Objective：To mechanismof investigate human and thedifferentiation T cytomegalovirus(HCMV)on