高效液相色谱法快速测定脑梗塞模型大鼠脑组织中多胺的含量.pdfVIP

第 27卷 第6期 川I 北 医 学 院 学 报 Vo1．27．No．6 2012年 12月 JOURNALOFNORTH SICHUAN MEDICALCOLLEGE Dec．2012 538 doi：10．3969／j．issn．1005—3697．2012．06．004 ·药学研究专题 · 高效液相色谱法快速测定脑梗塞模型大鼠脑组织中 多胺的含量 何颖娜 ，尚京川 ，杨志强 (1．河北医科大学中医学院，河北 石家庄 050091；2．重庆医科大学药物化学和生物材料研究室，重庆 400016；3．河北瑞 洲生物科技有限公司，河北 石家庄 050021) 【摘 要】目的：建立一种简便、灵敏和快速分离测定大鼠脑组织中腐胺、精脒和精胺等多胺含量的高效液相色谱法。方法： 采用苯 甲酰氯作为衍生化试剂，以1，6-己二胺为 内标，采用polygocyl(250X4．6mm5 m)c 色谱柱，流动相为甲醇一水 (62： 38V／V)，流速 1．0mL／min，检测波长 229nm。结果：本法线性范围是 1—2000／mL，回收率大于 90％。日内和 日间变异系数 为 1．5％ 4．2％。最低定量浓度为 1nmo~mL。结论：该方法符合生物样品分析要求，为脑组织中多胺的含量测定提供了一 种简便、准确、灵敏度高的分析方法 。 【关键词】多胺 ；高效液相色谱；固相萃取 【文章编号】1005．3697(2012)06-0538—04 【中图分类号】R741 【文献标识码】A Rapidhighperformanceliquidchromatographyassayofpolyaminesinrat brains HEYing．na ，SHANGJing—chuan ，YANGZhi—qiang (1．TraditionalChineseMedicalCollege，HebeiMedicalUniversity，Shijiazhuang050091，Hebei；2．ResearchInstituteofPharmicChem ‘ istryandBiomaterials，ChongqinguniversityofMedicalScience，Chongqing400016，Chongqing；3．HebeiNaturalCo．Ltd．Shijiazhuang 050021，Hebei，China) 【Abstract】Objective：Todevelopasimple，sensitiveandfastmethodfordeterminationofputrescine，spermidineandsperminein mouseratbrains．M ethods：W iththebenzoylchloridesasthederivationreagentand l，6-Hexanediamineastheinternalstandard，the polyamineswereseparatedonthepolygocylCl8(250X4．6mm5Ixm)columnusingmethanol—water(62：38V／V)asthemobilephase (floW rate1．0mL／min)withUVdetectoratwavelength229nm．Results：Thestandardcurvewaslinearinthecontentrange1—2000 nm01．mL～．Therecoverieswerehigherthan90％ andtheRSD wasintherangefrom 1．5％ to4．2％ ．The1OW limitsofquantifica— tionwereonenmol／mL．Conclusion：Theproposedmethodwassuitableofrscreeningpolyaminesinratbrains． 【Keywords】Polyamines；Highperformanceliquidchromatography(HPLC)；Solid—phaseextraction(SPE) 多胺 (polyamines)是指 以腐胺 (putrescine)、精 究表明：脑组织的中多胺代谢的紊乱与多种脑损伤 胺 (spermine)和精眯(sper